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- 文献和实验
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低温运输,4℃保存,6个月有效。
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现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
2×100ml
注意事项:含有内源性亲和素封闭液和生物素封闭液,能够很好的抑制内源性物质(主要是内源性亲和素-生物素)的活性,尤其适用于免疫组化中封闭内源性物质的活性。
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文献和实验荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。2)去离子甲酰胺(DF):将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min,用Whatman l号滤纸滤。3)体积分数70%甲酰胺/2×SSC:35mL甲酰胺,5mL 20×SSC,10mL水。4)体积分数50%甲酰胺/2×SSC:100mL甲酰胺,20mL 20×SSC,80mL水。5)体积
标记),42℃旋转振荡过夜。 (4)用20ml杂交缓冲液洗膜一次。 (5)倒掉溶液,加入4ml预热的杂交缓冲液,同时加入8μl与miRNA探针配套的“Amplifier”,42℃旋转振荡2h。(这一步是多生物素信号放大技术提高检测灵敏度的关键,如果是普通的试剂则跳过这一步骤) (6)用20ml杂交缓冲液洗膜一次。 (7)加20ml洗涤缓冲液,42℃旋转振荡30min。 5、信号检测 (1)用镊子将膜从杂交管中取出,放入显色盒(或者是可以容纳整张膜的容器)中,注意不要将膜重叠
分别为0.3%双氧水和0.3%Triton X-100混合而成。配制方法是先用微波加热的36 ml PBS,再接着加120 ul Triton X-100,并加热一会儿,冷却至临用前加0.4 ml 30%H2O2。4、5%羊血清或封闭血清,用PBS稀释。5、含0.03%H2O2的0.05%DAB(避光):用20×DAB(1%,10 mg/ml)5 ul+0.1 ul 30% H2O2+95 ul PBS。6、一抗用PBS稀释(也可用抗体稀释液),二抗用中杉金桥的SP染色试剂盒。7、Xylene、梯度
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