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联硕生物
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500ml
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文献和实验[目的与原理] 掌握醋酸纤维素薄膜电泳原理及操作技术,利用该电泳技术分析和测定人或鱼血清中各种蛋白质相对百分含量。醋酸纤维素薄膜电泳(cellulose acetate membrance electrophoresis)以醋酸纤维薄膜为支持物。它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。它溶于丙酮等有机溶液中,即可涂布成均一细密的微孔薄膜,厚度以0.1mm—0.15mm为宜。太厚吸水性差,分离效果不好;太薄则膜片缺少应有的机械强度则易碎。本实验以醋酸纤维素为支持物,分离各种血清
于颗粒本身的泳动速度和溶液的电渗作用。因此在选用支持物时,应尽量避免高电渗作用的物质。 3. 醋 酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素薄膜电泳是利用醋酸纤维素薄膜做固体支持物的电泳技术。醋酸纤维薄膜具有匀一的泡沫状结构(厚约 120 μ m ),渗透性强,对分子移动无阻力,用它做区带电泳的支持物,用样量少,分离清晰,无吸附作用,应用范围广和快速简便 , 且染色后的薄膜可用乙醇和冰醋酸溶液浸泡透明,透明后的薄膜便于保存和定量分析。 本实验以醋酸纤维素薄膜作为支持
1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。 2.试剂 (1) 巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。 (2) 氨基黑染色液 取0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液 取乙醇45ml、冰醋酸5ml及水50ml,混匀。 (4) 透明液 取冰醋酸25ml,加无水乙醇75ml,混匀。 3.操作 (1) 醋酸纤维素薄膜 取醋酸纤维素薄膜,裁成2cm×
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