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文献和实验物被固定在载体上,而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的 Ab※ 除去,结合标记物的测定可在固相上进行。 6. 酶免疫测定 酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相 EIA 中可不进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗体反应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相 EIA 在临床检验中较少应用
-1 pH 8.6的巴比妥缓冲液 称15.6 g巴比妥钠溶于900 m1蒸馏水中,用6 mol·L -1 HCl pH到8.6,加0.1 g叠氮钠,0.5 g牛血清蛋白,最后加蒸馏水至1000 m1。 (2)标准T4工作液 将不同量分装的标准冻干品5瓶,准确地用缓冲溶液(各瓶加0.5m1)稀释成为20、40、80、l60、320 ng·ml-1系列标准T4工作液,放4 ℃冰箱内备用。 (3)125I-T4应用液 将125I -T
培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。如果在Feed细胞,那么就需要采用MMC进行处理,抑制Feed细胞增殖,但仍然能保持其分泌LIF因子的活性。下文中暂不提及Feed细胞。Feed细胞可以来源于STO细胞或原代胚胎成纤维细胞。 培养基 ES: 配制一20×不含DMEM ,HS,LIF的溶液(该溶液也能用于EB培养基--见下文)。分装在50ml 离心管中,(稀释为2×,每管42ml),贮
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