三乙酰基-β-环糊精，AB66095-5g

蛋白质的表达、分离和纯化

，IPTG诱导下，超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白，该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子（Ni2+）固相化的层析介质加以提纯，实为金属熬合亲和层析（MCAC）。蛋白质的纯化程度可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。 试剂和器材 一、试剂 [1] LB液体培养基：Trytone 10g, yeast extract 5g, NaCl 10g, 用蒸馏水配至1000mL. [2] 氨苄青霉素：100mg/mL [3] 上样 缓冲液：100

手性色谱柱知识介绍

大小；α-环糊精只能允许单苯基或萘基进入，β-环糊精允许萘基及多取代的苯基进入，γ-环糊精仅用于大分子萜类。β-环糊精手性固定相应用范围最广。Ibuprofen通过β-环糊精色谱柱得到分离，说明了pH值对氢键的影响。当流动相的pH=7时，观察不到拆分的迹象。pH=4时，可达到好的分离效果。通常分离氨基酸时，常采用低的pH值，以抑制酸性基团的离子化，同时也增强氨基的质子化。磷酸三乙胺盐、乙酸三乙胺盐证明对β-环糊精色谱柱来说是很好的缓冲液。通常缓冲液是0.1%三乙胺溶液，用磷酸或醋酸调节到合适的pH值。高的流速

抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体

到pYZF载体，构成表达载体pYZcpp3。引物1： 5’- GTCTCCTCAGCCTCCACCAA-3引物2：5’-GCCGTCGCATGCTCACGGTGGGCACGGAGGACAGGGTGGGCATGT GTGAGTTTTGTC-3’6、抗CD20Fab和F（ab）2片段的表达及分离纯化挑取将载体pYZFcd20转化16C9菌株的单菌落接种5ml含氨苄青霉素50g/ml的2×YT培养基（每1000ml含蛋白胨16g，酵母提取物10g，氯化钠5g，pH7.4），37℃，200rpm，振荡