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联硕生物
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文献和实验one set of cells with 500 μg ml−1 dextran Alexa 488, 10 kDa (prepared at 1 mg ml−1 in internalization medium). Incubate a second set of cells with 500 μg ml−1 dextran Alexa 594, 10 kDa (prepared at 1 mg ml−1 in internalization medium
1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为 1.5%; 2. 收集培养的肿瘤细胞,用无血清的培养基洗涤1 次,将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中; 3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用 1 ml 加样枪缓慢滴入磁力搅拌的 250 mMCaCl2 溶液中,形成乳白色的藻酸盐小珠。继续静置于 250 mMCaCl2 中 30 min 即可 使用。以上操作步骤均在无菌条件下进行; 4. 将第 4 次免疫后 7 天的小鼠用苯巴比妥钠 0.1ml( 按 100 mg/kg 计) 腹腔
用苯巴比妥钠0.1ml (按100 mg/kg计) 腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后置于解剖台上,切开背部皮肤,皮下植入4粒藻酸盐包裹颗粒,缝合皮肤,外敷手术胶膜; 5. 天以后,小鼠经尾静脉注入100 μl (按100 mg/kg计) FITC标记的葡聚糖(FITC-Dextran); 6. 20 min后处死动物,取出藻酸盐颗粒,常温下加入1 ml的生理盐水,剪碎研磨颗粒,再加入1 ml的生理盐水,混匀标本,放置1小时,1500 rpm离心5 min。取上清液用荧
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