L-15培养基（含双抗）

双抗培养基

成份： 蛋白胨 10克 牛肉膏 5克 氯化钠 5克 无水亚硫酸钠 3克 柠檬酸钠 10克 蔗糖 10克 琼脂粉 20克 水 1000毫升 制法： 1将上物称好，加热溶于水中． 2调PH8．2—8．4 3 分装高压灭菌后备用． 倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50℃左右，按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀， 倾注平板，凝固后备用． （庆大霉素：150u/毫升，多粘菌素：1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内，此相当于庆大霉素0.3u/毫升

细胞要做基因沉默相关实验，培养基可以加双抗吗

华之风问：请教园里战友，本人拟用siRNA转染做平滑肌细胞，观察基因沉默后效果的，但是我们实验室环境不太好，细胞培养容易污染，想加双抗，但不知道加双抗对基因转染沉默有无影响，谢谢！丁香园网友hainblue认为：有影响的，以前用脂质体转染的时候，说明书上说的是转染时不要用含有抗生素的培养基。他的解释是可能引起细胞死亡。具体怎么样就不知道了，比较试剂很贵，没钱作者方面的尝试。丁香园网友laugh认为：大多数不可以，因为增加了细胞通透性，抗生素的进入会增加细胞的死亡，但Qiagen

小心翼翼还是养不好细胞？师兄说了一个让我惊呆的原因

NaHCO3 浓度的 Earle's 平衡盐溶液，并且由培养箱维持 5～10% CO2。通常，1.2～2.2g/L NaHCO3 配合 5% CO2，3.7 g/L NaHCO3 配合 10% CO2。精确的计量因培养基配方而不同。除了 Leibovitz's L-15 (ATCC No.30-2008)，ATCC 所有培养基都要匹配 5% CO2。绝大多数 ATCC 培养基含 1.5g/L NaHCO3 以及额外的丙酮酸钠。而 Gibco Hyclone 很多品牌的培养基里都含有 3.7 g/L