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文献和实验100%及75%的淋巴细胞分离液,其上再沿管壁轻轻加入细胞悬液,经2000r/min 离心20min,收集100%分离液界面上的细胞为富含TIL 细胞的悬液(75%的界面上是肿瘤细胞),再用RPMI1640 或X-VIVO15 培养液将TIL 细胞洗2 次,以除去细胞分离液。 4.将洗过2 次的TIL 细胞用含10%AB 型血清、20%LAK 细胞培养上清液及200u/ml IL-2 的RPMI1640 培养液再悬浮。(或用20%LAK 细胞培养 上清液及200u/ml IL-
XXXX原代细胞干预培养与激光共聚焦蛋白细胞定位实验 实验试剂:PBS(磷酸盐缓冲液pH7.4)(实验室常规配置);非免疫山羊血清;Triton X-100(sigma);BSA抗体稀释液(实验室常规配置);A蛋白抗体(Santa cruz);B蛋白抗体(Abcam);Alexa Fluor® 488 donkey anti-goat IgG (H+L)(Invitrogen);Alexa Fluor® 555 Anti-Rabbit IgG (H+L), F(ab
浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛40g蒸馏水 400mlB液:Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水 300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水 200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH或1N HCl 将pH调至
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