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联硕生物
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文献和实验Yeast Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)
inoculated should be such that the culture reaches the desired A600 the next morning. (For example, 130 microliters of a wild-type strain/100 ml YPD inoculated at 5:00 pm will be at an A600 of ~1.2 at 8:00 am next morning) Day 3 1. Check A600
Methods for use with the mTn-3xHA/lacZ-mutagenized library
are increased. Cells are resuspended in 1 ml of One Step buffer containing 1 mg of denatured salmon sperm DNA. 100 ul aliquots of this suspension are then added to tubes containing from 0.1 to 1 ug of Not I digested plasmid DNA. Tubes
. 用的是Roche molecular Biochemicals公司的由100kd,75kd,45kd,30kd,20kd,10kd组成的marker。开始做Western Blot时还能够看到marker,当然也仅能看见其中最多三条带。用80V进行SDS-PAGE电泳,用恒压10V45min转印的。前几次做 Western Blot时没有进行丽春红染色,但尽管用了此方法也仅能看到marker有一条大约是30KD的条带出现。再就是把70KD和130KD两个目的蛋白同时 在一块胶上进行分析,用培养基样品进行分析
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