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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
2年
- 英文名:
ColorMixed Protein Marker(15-130KD)
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝
- 规格:
100ul(20T)/250ul(50T)/2*250ul(100T)/10*250UL(500T)
| 规格: | 100ul(20T) | 产品价格: | ¥200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 250ul(50T) | 产品价格: | ¥360.0 |
| 规格: | 2*250ul(100T) | 产品价格: | ¥560.0 |
| 规格: | 10*250UL(500T) | 产品价格: | ¥2160.0 |
货号: PR1950
规格: 20T (100μL)/50T(250μL) /100T(250μL×2) /500T(250μL×10)
保存: -20℃保存,有效期至少2年。
产品特点:
l 三色预染,颜色鲜亮,条带整齐,便于观察。
l 用量少,节约成本,仅5ul即可完美呈现(1.5mm,10孔梳)。
l 广谱多带,一支即可满足多种实验需求。
产品简介:
本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白,分子量范围为15kD-130kD,每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带,其中70kD条带为红色,25kD条带为绿色,其余条带为蓝色。
使用说明:
1. 本产品是即用型液体,可直接上样电泳。上样前无需加热,稀释或添加还原剂。
2. 上样5ul,SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。
3. 建议分离胶浓度为15% 。
电泳示意图说明:
注意事项:
1. 本产品含有较高浓度甘油,常规-20℃保存为液体状态,可直接使用。若冰箱温度不稳,导致结冰,可适当分装后置于4℃保存,至少稳定6个月。
2. Marker分离效果与PAGE胶浓度相关,若分离胶浓度低于15%,25kD以下条带不易分离,但不影响绿色(25KD)及以上条带。如果目的条带小于25KD,建议分离胶浓度大于或等于15%。
3. 转膜效果与转膜时间有关,需根据客户目的条带大小而定,如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功,属于正常现象。
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文献和实验吧,以我的经验来看,除非目的蛋白特别小,或者特别大,不然转膜时间真的不是那么重要,曾经因为失误,转了15 min就拆下来了,但从丽春红染色来看,跟平常实验也没有太大的区别。 蛋白来源:内皮细胞 总蛋白 蛋白名称(可保密):occludin & AKT 蛋白分子量:65 KD & 56 KD WB用膜类型、孔径:0.45 PVDF 转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒压 100 V 转膜时间:60
,与分子克隆(第二版)上的加样buffer混合,沸水变性5分钟,上样。不知道是哪里出了问题? 解答:建议:1、首先确定您提的蛋白质量如何?可用PIERCE公司的BCA试剂盒测蛋白的浓度,一般来讲,其浓度应该在几-20微克/微升。 2、若是蛋白没问题,哪就看是不是电泳的问题,首先要看胶的浓度,您目的蛋白的分子量分别是55KD、29KD,建议分别用10%和12%的胶。60-80V,1小时左右。跑过积层胶与分离胶的线时,换用100V,3-4小时。 3、转膜,建议恒压,15V,不用转2小时,45
的marker。开始做Western Blot时还能够看到marker,当然也仅能看见其中最多三条带。用80V进行SDS-PAGE电泳,用恒压10V45min转印的。前几次做Western Blot时没有进行丽春红染色,但尽管用了此方法也仅能看到marker有一条大约是30KD的条带出现。再就是把70KD和130KD两个目的蛋白同时在一块胶上进行分析,用培养基样品进行分析,没有用间接法,而是直接用融合蛋白C端的V5表位的酶联抗体(Anti-V5-HRP)。但就是出不来结果,我很茫然。谢谢您过给予指点!解答










