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联硕生物
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500ml
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文献和实验Purpose Materials10ml 6% dextran + 7ml citrate/citric acidDextran: T500 --> 6g+100ml PBSCitrate solution: 25g Na Citrate + 8g citric acid + 500 ml PBS 43 ml blood 12 ml RT Histopaque 107718 ml cold H2 O2 ml 10x PBSM199 for HUVECs: 1L powder pocket
相关专题 成功走出第一步:DNA提取 碱裂解法 大量提取质粒(500mL菌液) 1、取培养至对数生长后期(一般培养12~16小时)的含待提质粒的细菌 培养液于离心杯中,配平,4℃下4000rpm离心15min,弃上清,然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。 2、向盛有细菌 沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ,重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ,用干净的玻璃棒搅拌均匀后,再加剩下的部分)。
~5%人AB血清的RPMI-1640 培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应〉90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞 1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS 以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percoll与含0.75%牛血清蛋白的RPMI-1640培养液混合配成41.1%
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