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RT
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99
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联硕生物
- 规格:
500ml
纯度:0.1mol/L,pH3.0
保存温度:RT
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
X 蛋白酶抑制剂混合物 PIC#7012 和 10X 甘氨酸溶液#7005,直到完全溶解。配制 ChIP 样品制备所需要的各种试剂:包括:缓冲液 A(主要是对细胞膜进行裂解,同时对核膜进行打孔,以便于后续微球菌核酸酶进入核内发挥酶解作用):我们按照实验设计,需要配 3 倍反应需要的体积,同时加入合适的 DTT 和 200X 蛋白酶抑制剂混合物(PIC),在冰上预冷。按照说明书的描述,每 4X 106 细胞,准备 1 ml 1X 缓冲液 A(250 ul 4X 缓冲液 A #7006+750ul 水
Tris(MW121.14) 3.03g 甘氨酸(MW75.07) 18.77g SDS 1g 蒸馏水至 1000ml 溶解后室温保存,次溶液可重复使用 3~5次。 转移缓冲液 甘氨酸(MW75.07
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