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RT
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99
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联硕生物
- 规格:
500ml
纯度:pH5.5
保存温度:RT
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文献和实验烷基硫酸钠(SDS);三羟甲基氨基甲烷(Tris);乙二胺四乙酸(EDTA);饱和酚;氯仿;异戊醇;无水乙醇;75%乙醇;蛋白酶K;RNase酶;手术剪刀、镊子、吸水纸;微量取液器;研钵、1.5mL 离心管、一次性手套、1.5mL离心管架、记号笔…… 试剂配制 1.Tris-HCL 1mol/L PH8.0 50ml 配制方法:40ml双蒸水,6.057g固体Tris放入烧杯中溶解,用浓盐酸调PH值到8.0,转移到50ml容量瓶中,加入双蒸水定容,摇匀后,转到准备好的输液瓶中,贴上标签,高压灭菌后,降至室温
离心管口并倒置离心管使上清全部流尽。 2)将细菌沉淀重悬于100ml用冰预冷的STE中。 STE 0.1mol/L NaCl 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L?EDTA(pH8.0) 2)按步骤1)所述方法离心,以收集细菌细胞。 2,碱裂解法 1)将冼过的500ml 培养物的细菌沉淀物[ 来自收获细菌的步骤3] 重悬于10ml(18ml)溶液I中。 溶液I 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/L EDTA(pH8.0) 溶液
】1. 消化缓冲液:100 mM NaCl,10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0),0.5% (w/v) SDS,0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存;2. 将 200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮,然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
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