青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗,无菌)，AB

手把手教你做好体外 DNA 重组

；3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品，1700×g，离心 10 min。如果样品溶解得不好，再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液，重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质，重复抽提一次，将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中；4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇，12 000 rpm 离心 2 min；5. 用 70% 乙醇洗涤，晾干，沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋

正常角膜内皮细胞培养

实验材料： 1. 角膜材料：可以取自人眼、兔眼或者牛眼，人眼材料最好来自胎儿； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 特殊器械：虹膜恢复器； 4. 消毒液：1：5000的升汞溶液与100IU/ml的庆大霉素生理盐水； 5. 消化液：0.25%胰蛋白酶-0.01%EDTA混合溶液； 6. 培养液：基础液由DMEM培养基加入HEPES 6.0g/L、NaHCO3 2.2 g/L

支原体污染的特点及检验（3）

引物：5’-TGCACCATCTGTCACTCTGTTAACCTC-3’ 2) PCR扩增 （1） 在冰浴中对各样品制备PCR重要混合物，对每个样品均加入：　　10X PCR缓冲液 5.0ml　　25mmol/L dNTPs 混合物 0.4ul　　40umol/L 16sr DNA引物 每种引物1.0ul　　40umol/L pBR322 DNA 引物 每种 2.0ul　　pBR322 DNA 1pg/ml 2.0ul　　DNA聚合酶（5U/ml） 0.2ul　　三蒸水 35.4ul　　总量 45ul （2） 用无菌去离子水稀释样品为1:10