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-20℃
- 英文名:
3,7,11,15-TETRAMETHYL-2,6,10,14-HEXADECATETRAENYL PYROPHOSPHATE AMMONIUM SALT
- 库存:
99
- 供应商:
联硕生物
- CAS号:
6699-20-3
- 规格:
200ug
纯度:1mg/mL in methanol: NH4OH (7:3)
保存温度:-20℃
英文名称:3,7,11,15-TETRAMETHYL-2,6,10,14-HEXADECATETRAENYL PYROPHOSPHATE AMMONIUM SALT
分子式:C20H36O7P2
SPKNFJEBHRMZYXVTQWDIGUCAOL
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文献和实验)。 ④碳酸盐缓冲液(pH9.5)调整pH至9.0~9.5,使抗体与活化HRP结合,4℃24h。 ⑤加入0.1ml赖氨酸缓冲液,阻断未反应的醛基,4℃,2h。 ⑥用半饱和硫酸铵沉淀5次,对PBS透析24h,4℃,换3次PBS,除去硫酸铵(10000rpm/min,30min)。 ⑦或用凝胶 色谱 法(Sephadex G-200/Sephacryl S-200) 等分离标记抗体。 注意:该方法要求HRP
2.8的HRP,含有较多的游离氨基,与戊二醛反应后,易形成多聚体,使方法的敏感性下降。 2.过碘酸盐氧化法 严格地讲,过碘酸钠(Sudium periodate)不是一种真正的偶联剂,其本身并非作为桥连结在抗体和酶之间,而是借助于过碘酸钠的氧化作用,将酶连结在抗体上。该方法仅适于含糖较丰富的酶(如HRP)的标记。我们知道,HRP分子的糖本身与酶活性无关,利用过碘酸钠氧化这部分糖分子内的-CH基,使之生成-CHO基,再与抗体蛋白的游离氨基反应,生成Shiff’s碱。此Shiff’碱在pH降低时
偶联到不溶性载体上的配基上,然后改变原有的条件,如洗脱液的PH 值、离子强度、有机溶剂的浓度等,有选择性地从载体上把被分离物洗脱下来。通过亲和层析法分离的物质,其纯度、活性回收率及纯化倍数均较高。 亲和层析的载体要选用机械强度高、非特异性吸附少、水不溶性的、具有较多化学反应基团—羟基的多糖类介质,该载体在温和条件下与配基共价偶联,而又不影响配基及被分离物质原有的生物学特性。 1967年Porath 和Ernback 报道了采用溴化氰可将含有氨基的有机分子偶联到多糖基
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