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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 英文名:
1-Trityl-1H-imidazole-4-carboxylic acid
- 库存:
99
- 供应商:
鹿森生物
- CAS号:
191103-80-7
- 规格:
250mg
纯度:98%
保存温度:RT
英文名称:1-Trityl-1H-imidazole-4-carboxylic acid
分子式:C23H18N2O2
EUVHTNRFLYIBWXQZDAKSCOPGMJ
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文献和实验实验步骤 1. 抗Fab片段抗体亲和层析纯化法 1) 偶联抗人或抗鼠Fab片段抗体到Protein G Sepharose,将纯化的抗人或鼠Fab片段抗体以2mg/ml的比例与Protein G Sepharose凝胶珠溶液混合,室温旋转孵育1h。用10倍量的0.2mol/L硼酸钠(pH值9.0)洗两次,4 000r/min离心5min,用10倍量的0.2mol/L pH值9.0硼酸钠溶液,重悬凝胶珠子,加入足够量的DMP
Hanks液的小平皿内,用钝头直角9号注射器针头破少许脾被膜后,赶出细胞,用毛细吸管轻轻吹散细胞团后,将悬液通过250目尼龙网,取滤液,1000r/min离心5min,Hanks液洗涤3次,计数细胞后,用1640液重新悬浮细胞,配成所需浓度; (4)往各孔中加入0.5ml含不同浓度(104-106/ml)的细胞悬液,置37℃,5%CO2条件下孵育2-4h,甩去培养液,PBS-T洗涤3次,每次3min; (5)往各孔中加入0.5ml生物素化抗体(Bio-Ab)(2μg/ml),37℃
修复后,PBS洗3×3min。(2)滴加特异性一抗,37℃孵育1h,PBS洗3×3min。(3)滴加适当稀释的寡核苷酸标记二抗IgG 200nmol/L(用100mmol/L谷氨酸钾-PBS稀释),37℃孵育30min,PBS洗3×3cm,用100mmol/L谷氨酸钾洗。(4)循环寡核苷酸(170mmol/L),用φ29缓冲液稀释[缓冲液内含250mmol/L(pH7.5)Tris-HCl,50mmol/L MgCl2,1mg/ml BSA,lmmol/L dATP,1mmol/L dCTP,1mmol
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