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鹿森生物
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文献和实验。(2)贮存液B(8%多聚甲醛溶液):称8g多聚甲醛加入100ml蒸馏水中,配成8%多聚甲醛液(方法见前)。过滤后4℃冰箱保存。(3)临用前,以3份A液与1份B液混合,再加入结晶过碘酸钠(NaIO4),使NaIO4终浓度为2%。由于AB两液混合,pH从约7.5降至6.2,故固定时不需再调pH值。固定时间为6~18h。该固定剂较适于富含糖类的组织,对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。其机制是借助于过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基,通过赖氨酸的双价氨基与醛基结合,从而与糖形成交联。由于组织抗原绝大多数都是
~5%人AB血清的RPMI-1640 培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应〉90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞 1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS 以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percoll与含0.75%牛血清蛋白的RPMI-1640培养液混合配成41.1%
人AB血清的RPMI-1640培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应〉90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞 1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percoll与含0.75%牛血清蛋白的RPMI-1640培养液混合配成41
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