SDS-PAGE蛋白质次高分子标准，AB64568-100u

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）

  　　⑥1ml注射器及6号长针头　　⑦微量注射器（10μl或50μl）              　　⑧水泵或油泵　　⑨真空干燥器                            　　⑩培养皿（直径120mm） 2．试剂： （1）标准蛋白质 目前国内外均有厂商生产低分子量及高分子量标准蛋白质成套试剂盒，用于SDS-PAGE测定未知蛋白质分子量。 ①高分子量标准蛋白试剂盒（Pharmacia公司产品，表中16-1）。 表16-1  5种标准蛋白质 同时按说明书要求处理 ②

紫外分光光度法测定蛋白质含量

分光光度计；玻璃比色皿一套；考马斯亮蓝G250； 牛血清蛋白；超纯水。 1.2 试液的制备： 牛血清蛋白标准溶液（1000ug/ml）的制备 称取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中，加入超纯水溶解并定容。 考马斯亮兰G250 试剂 称取100mg考马斯亮兰G250，溶于50ml95％的乙醇后，加入120ml85％的磷酸，用水稀释至1升。 2. 结果与讨论 2.1 校正曲线的绘制 准确吸取1000ug/ml牛血清蛋白标准

Western-blot实验操作手册

过程恒压的方式，通常把电压设置在100V，然后设定定时时间为90-120分钟。设置定时可以避免经常发生的电泳过头。 通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳，或者可以根据预染蛋白质分子量标准的电泳情况，预计目的蛋白已经被适当分离后即可停止电泳。 3. 转膜(Transfer)： (1)膜的选择：推荐在Western实验中选用PVDF膜。 硝酸纤维素膜(NC膜)也可以使用，但硝酸纤维素膜比较水浴加热3-5分钟，以充脆，在操作过程中特别是用镊子夹取