磷酸氢二钾缓冲液，AB64255-500ml

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

乳酸脱氢酶活力测定

。 试剂和器材 一.试剂 50mmol/L pH6.5磷酸氢二钾－磷酸二氢钾缓冲液母液： A: 50 mmol/L K2HPO4: 称K2HPO41.74g加蒸馏水溶解后定容至200mL。 B: 50 mmol/LK2HPO4: 称KH2PO43.40g加蒸馏水溶解后定容至500mL。 取溶液A 31.5mL ＋溶液B 68.5mL, 调节pH至6.5。置4℃冰箱备用。 10mmol/L pH 6.5磷酸氢二钾－磷酸二氢钾缓冲液用上述母液

凝胶过滤层析

，如果要进行精细分离纯化，首选Supedex或Superose等高分辨系列的凝胶过滤填料。 2.选择合适的分离范围，要确保待分离的蛋白在所选的填料的分离范围之内。 3.根据样品体积选择合适的层析柱体积，在进行精细分离时凝胶过滤上样量不超过5%柱体积，一般建议为2%～3%柱体积，因此如24 mL层析柱一般建议上样体积为不超过500 μL。120 mL层析柱建议上样体积为不超过5 mL。在进行组份分离如脱盐时，最大上样量不超过30%柱体积，如5 mL 脱盐柱最大上样体积一般不超过1.5 mL。 4.在预