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- 文献和实验
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- 保存条件:
2-8℃
- 库存:
99
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
500ml
纯度:不含糖
保存温度:2-8℃
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文献和实验培养基配方: (胰)蛋白胨: 10g 酵母提取物: 5g 氯化钠: 5g 琼脂粉: 15g 九、核糖核酸酶A溶液配制 制备不含DNA酶的RnaseA:将胰核糖核酸酶(RnaseA)溶解在0.01mol/L的醋酸钠缓冲液(pH5.2)中,使终浓度为10mg/mL,沸水煮15min,放在室温下,缓慢冷却,用0.1体积的1M Tris-HCl(pH8.0)调整pH至7.4左右,分装小管保存在-20℃备用。 注:当浓缩的溶液
板可通过25%Percoll离心5min去除,也可在原密度梯度中加入第三个25%Percoll一起离心去除。 9) 中性粒细胞层用PPP液冼1次,再用含糖的Krebs-Ringer磷酸缓冲液(KRPD,PH7.23)洗1次。 10)用这种方法可得80%中性粒细胞,纯度在95%以上。 3、“无LPS”方法(LPS-Free method) 1)已有用变形细胞(如白细胞)裂解的方法表明,容器及溶液的不含LPS,也就是说,LPS的含量小于0.1ng/ml。 2) 无菌采集静脉血,用10%柠檬酸钠抗凝
%Percoll(均为用PPP新鲜配制)、2~3ml细胞悬液,275gX10min. 8)单个核细胞及部分血小板位于血浆与42%Percoll液之间,中性粒细胞位于42%Percoll与51%Percoll之间。血小板可通过 25%Percoll离心5min去除,也可在原密度梯度中加入第三个25%Percoll一起离心去除。 9)中性粒细胞层用PPP液冼1次,再用含糖的Krebs-Ringer磷酸缓冲液(KRPD,PH7.23)洗1次
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