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-20℃
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99
- 供应商:
鹿森生物
- CAS号:
58-64-0
- 规格:
10ml
纯度:ADP,1mmol/L
保存温度:-20℃
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文献和实验~5%人AB血清的RPMI-1640 培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应〉90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞 1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS 以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percoll与含0.75%牛血清蛋白的RPMI-1640培养液混合配成41.1%
人AB血清的RPMI-1640培养液中,计数细胞,用1%台盼蓝染色检测细胞活力(应〉90%),再用同样培养液将细胞配成1×106~2×106/ml。 2)分离大颗粒淋巴细胞 1.配制不连续Percoll梯度:取Percoll原液与10倍浓缩的PBS以9:1的比例混合,此时溶液为100% Percoll,比重是1.127,毫克分子渗透压浓度为290mOsmol/kg。将100% Percoll与含0.75%牛血清蛋白的RPMI-1640培养液混合配成41
、 50.0 %、 45.8 %和 41.1 %的 Percoll 溶液各 10ml ,使分别形成明显的交界面。再小心加水 10ml 约含 5 × 108 PBMC 的细胞悬液。水平离心 500 × g 30 分钟。 3. 分别收集各交界面的细胞,用 RPMI-1640 培养液洗涤细胞 3 次,每次离心 500 × g 10 分钟。用含 2 %~ 5 %人 AB 血清的 RPMI-1640 培养液将细胞配成适当浓度。 LGL 的密度较低,主要在 41.4 %和 45.8 %的交界面。 50 %
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