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- 文献和实验
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RT
- 库存:
99
- 供应商:
鹿森生物
- CAS号:
593-84-0
- 规格:
100ml
纯度:5mol/L,RNase free
保存温度:RT
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文献和实验;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
物被固定在载体上,而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的 Ab※ 除去,结合标记物的测定可在固相上进行。 6. 酶免疫测定 酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相 EIA 中可不进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗体反应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相 EIA 在临床检验中较少应用
而破坏 mRNA 活性。 2.但DEPC能与胺和巯基反应因而含 Tris 和 DTT 的试剂不能用 DEPC 处理。 四、实验步骤 1. 取 50~100mg 的组织加入1 ml Trizol 试剂,用匀浆器打匀( Trizol 先放于冰上)。 2. 将匀浆室温放置 5 min。 3. 加入 200 μl 氯仿剧烈震荡混匀 30s,冰上静置 3 min。 4. 12000 rpm,4℃ 离心 15 min。 5. 将上清液小心转移到新的 1.5 ml离心管中(取 400
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