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RT
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99
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鹿森生物
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500ml
纯度:PH=8.5
保存温度:RT
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
-LB液体培养基,37o C,300 rpm振荡培养转化子至对数生长期。 2) 用0.5 mM IPTG诱导6小时,取出20ul培养液,加入等体积的SDS-PAGE上样缓冲液,100o C煮沸10分钟,离心取上清液进行SDS-PAGE检查转化子中各变种酶基因的表达情况。 3) 将高表达转化子5 mL菌液转接至500 mL氨苄- LB液体培养基中37 o C,300 rpm培养至对数生长期,用0.5 mM IPTG诱导8小时,收集菌体。
剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
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