雷公藤定碱，AB60234-5mg

【原创】微板考马斯亮蓝蛋白定量法 ，大家共享!评论一下各位的心得

处理、洗洁精浸洗或用新的。   2. CBB子液与所加标准品和样品的量视情况适当调整，本方案所列出比例及OD值仅供参考。   3. 若样品为悬浊液，应将样本离心后取上清做蛋白定量以反应总蛋白量；或先将悬浊液碱化为溶液后再行测定（加入5-20％体积的2-5mol/L的NaOH，视情况而定）。   4. 所有样品宜在2-10min内测完。   5. 若对上样精度有把握，可以直接在酶标板内先后直接加入适量样本与测定工作液进行反应。 6.本文件取自于别人，贴出来，大家共享也请大家评论一下此法的优劣.

胶体金标记物的制备

沉淀：长期低温保存的蛋白质或4℃较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/ml的情况下，很容易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响，因此，标记之前须离心以除去这些聚合物。一般以100000r/min 4℃离心60min取上清液，调整蛋白质浓度至1mg./ml即可用于标记。二、胶体金pH值的调整胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高

ICC用细胞抗原的制备

抗原的制备 1)        未感染细胞接种到96孔板(方法见”悬浮细胞玻片法抗原制备”1-5步),并完全贴壁。    2)        摔去PBS液,加入少量病毒液(加入量由先做棋盘试验来确定浓度,或先测定病毒滴度而定,且病毒液用2%-5%血清DMEM完全培养液稀释),每孔50ul,摇匀,使充分覆盖细胞表面 ,37℃ CO2培养箱培养（MCMV感染NIH3T3 HCMV感染HFF）。 3)        每天观察细胞形态变化,早期CPE为细胞肿胀,中期聚集,晚期则圆缩。 4)