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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 英文名:
Wilforine
- 库存:
99
- 供应商:
鹿森生物
- CAS号:
11088-09-8
- 规格:
10mg
纯度:HPLC≥98%
保存温度:2-8℃
英文名称:Wilforine
分子式:C43H49NO18
JQFIDPLTUMAYWKEBZVRXHCNOSG
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文献和实验平板上取出一个菌落,移至含有2ml LB/Amp培养基的试管中。在37℃条件下振荡培养12-16h。2.将1.5ml培养物移至1.5 ml Eppendorf管中,4000 rpm离心8min。3.弃上清,将细菌沉淀悬浮在100μl预冷的溶液I中,并加入2.5μl RNase A(10mg/ml)。4.加200μl新配制的溶液II, 盖紧管口。快速颠倒离心管5次使内容物混合、放置冰上5min。5.加150μl预冷的溶液III,盖紧管口。将管颠倒5-8次,冰上放置20min。6.离心(1000rpm,4℃
PH值至8.0(约需4gNaOH)。用蒸馏水定容至200ml。后送至高压灭菌。室温保存。再配制50×TAE溶液:在400ml蒸馏水中溶解121g Tris碱,加入28.55ml冰乙酸和50ml 0.5ml/L EDTA溶液,再加蒸馏水定容至500ml,室温保存。(2)琼脂糖溶液(1.0%):50×TAE溶液取10ml,稀释成500ml,取50ml溶解0.5g琼脂糖,电炉上煮至沸腾,溶化的琼脂物冷却至60℃左右时加入10mg/ml EB 5ul,充分混匀,将温热的凝胶倒入已置好梳子的电泳板中,在室温下放置45
改良过碘酸钠标记法制备酶标抗体 HRP分子中与酶活性无关的糖基被过碘酸钠氧化为醛基,再与抗体蛋白的氨基形成Schiff碱。为了防止酶蛋白的氨基与醛基发生自身偶联,在标记前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封闭酶蛋白中残留的a-和e-氨基。酶与抗体的结合反应后,再加入硼氢化钠还原成稳定的结合物。 (1) 取HRP 5mg溶于0.2mol/L,pH5.6醋酸盐缓冲液1ml中,加入1%DNFB无水乙醇溶液0.1ml,室温下轻微搅拌1h
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