槲皮素-3-龙胆二糖甙，AB60170-5mg

细胞染色常用染色试剂及细胞染色方法

BSA稀释1：50-100)25µl于封口膜上，将盖玻片细胞面朝下反扣在一抗液滴上，放在湿盒中室温孵育1-3小时 将盖玻片从封口膜上小心夹起，细胞面朝上放入原来的24孔板中，PBS洗两次，取另外一张封口膜，做好标记，加二抗(羊抗兔罗丹明，用5mg/ml BSA稀释1：50-100)25µl于封口膜上，将盖玻片细胞面朝下反扣在一{二}抗液滴上，放在湿盒中室温黑暗中孵育1-3小时 (7) 同上PBS洗两次，同上操作，将玻片与10µl DAPI (1µg/ml in PBS，贮存

胶体金标记物的制备

沉淀：长期低温保存的蛋白质或4℃较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/ml的情况下，很容易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响，因此，标记之前须离心以除去这些聚合物。一般以100000r/min 4℃离心60min取上清液，调整蛋白质浓度至1mg./ml即可用于标记。二、胶体金pH值的调整胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高

ICC用细胞抗原的制备

。 3、诱导液(TPA)：12-邻-十四酰-佛波醇-13-乙酸酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)溶于丙酮，配成20mg/ml。                                        二、实验步骤    (一)        、用96孔细胞培养板制备贴壁细胞抗原(正常贴壁细胞)         1、HFF,NIH3T3细胞用含10%血清DMEM完全培养液在75cm2培养瓶中单层培养,使密度达到90%