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NCI-H2286人小细胞肺癌细胞

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  • SAIOS(赛奥斯)
  • CL-777h
  • 中国,武汉
  • 2025年12月17日
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      武汉赛奥斯生物科技有限公司

    • 库存

      999

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 运输方式

      常温/干冰

    • 细胞形态

      上皮细胞样

    • 物种来源

    • 规格

      1×10⁶cells

    NCI-H2286人小细胞肺癌细胞

    产品编号:CL-777h

    一、细胞介绍

    NCI-H2286人小细胞肺癌细胞是一种来源于人类小细胞肺癌的细胞系,常用于癌症发病机制、药物敏感性及肿瘤生物学研究。该细胞系保留了小细胞肺癌的典型特征,适用于体外实验建立疾病模型、抗癌药物筛选等科研领域。

    二、细胞特性

    来源:57岁白人女性1期小细胞肺癌患者的肺,腺癌

    形态:上皮细胞样,贴壁生长

    含量:>1x10⁶cells

    规格:T25瓶x1(常温运输)/含有1mL细胞悬液的冻存管x2(干冰运输)

    用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途

    三、完全培养基及冻存液配制

    1) 该细胞完全培养基为:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

    2) 培养环境:37℃;95%Air,5%CO₂;培养箱湿度为70%-80%

    3) 冻存液:推荐使用非程序无血清细胞冻存液(货号:RC-0102)

    四、收货注意事项

    1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落,请拍照后及时与我们联系。

    2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱静置约2-4h,在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5×物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10×和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

    3) 对于贴壁生长的细胞:①静置后显微镜下观察细胞生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。②若细胞密度未超过80%,可去除培养瓶中旧液(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新的完全培养基5mL,放入培养箱中继续培养(若培养瓶为密封瓶盖须拧松瓶盖)。③若细胞密度超过80%,请立即传代(若因运输振动脱落的细胞需要离心回收),首次传代,建议1:2传代(1:2传代指传代至两个同等底面积的培养瓶/皿)。

     

    细胞培养操作说明

    一、细胞复苏

    1. 将含有1mL细胞悬液的冻存管快速放入37℃水浴中解冻,轻轻摇晃加速溶解,直至冻存管中无结晶,然后用75%酒精擦拭冻存管外壁。

    2. 将冻存管内容物加入到含有5mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm离心5min。

    3. 弃去上清液,用1-2mL完全培养基生补加5-6mL完全培养基后吹匀,接种于T25培养瓶中,放入培养箱中培养过夜。

    4. 第二天换液并检查细胞密度。

    注意:在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和佩戴防护面罩,避免冻存管爆炸造成人员伤害。

    二、细胞传代:细胞密度达80%-90%,即可进行传代

    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2. 加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-3min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后,加5mL以上含10%血清的培养基终止消化。

    3. 轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,1000rpm离心5-8min,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基后吹匀。

    4. 按5-6mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按1:2~1:3的比例分到新的含5-6mL完全培养基的培养皿中或者培养瓶中,放入培养箱中培养。

    三、细胞冻存

    收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。步骤如下:

    1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。

    2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清,用细胞冻存液重悬细胞,按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

    3. 将要冻存的细胞放入程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

    注意事项:

    所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全柜内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

     

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