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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Western及IP细胞裂解液
- 库存:
现货
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
100 mL
产品简介:
品牌:Keygen/凯基生物
货号:KGB5202-100
产品名称:Western及IP细胞裂解液 KGB5202-100
规格:100 mL
保质期:12个月
储存温度:2-8℃
运输条件:冰袋运输
品牌介绍:
江苏凯基生物技术股份有限公司,是一家深耕生命科学工具产品与服务、聚焦细胞生物学试剂产品、具备诊断产品临床、注册到商业转化能力的生命科学品牌供应商,依托细胞生物学、蛋白与免疫、分子生物学等关键核心技术,已形成完整的自主开发与产销体系,部分生物核心原材料“自主可控”,拥有知识产权90余项,通过ISO9001质量管理体系认证、ISO13485质量管理体系认证、GB/T29490知识产权管理体系认证,是国家专精特新小巨人企业、国家高新技术企业、国家科技部国际合作示范基地、江苏省科技型企业、江苏省生物试剂关键原料工程技术研究中心、江苏省生物医药核心材料绿色制造基地、江苏省服务型制造示范企业。明星产品线包括细胞培养基、无血清冻存液、细胞凋亡、细胞增殖检测试剂盒等。
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文献和实验into eppyincubate 45' 4℃ à Vortex several times duringspin 10 secs 4℃divide sample: ~400 l for IP/ ~ 100 l for WesternIP -- 1° Ab => 4℃ 1 hour rockingif 1° is not rab.à 2° Ab => 4℃ 1 hour rocking (RaM 2l)-- PrA/Seph 4℃ 1 hour rocking 40l-- Spin down 4℃ 1'-- Wash 3X
其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11:使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子,而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行,在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白,从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白,然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析,从而确认互作
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
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