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HAMSTER LCMV ELISA KIT
试剂盒简介
此试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验。依次往预包被 HAMSTER LCMV抗原的酶标板微孔中加入样本、HRP标记二抗,经过孵育并彻底洗涤,用底物TMB显色后终止液终止反应。再用酶标仪在波长450nm(参比波长630nm)处测定吸光度(OD值),从而判定检测样品中抗LCMV抗体(LCMV-IgG-Ab)的存在与否。
试剂盒组分
|
序号 |
名称 |
配置 |
储存 |
|---|---|---|---|
|
1 |
LCMV预包被酶标板(96T) |
1块 |
4-6℃ |
|
2 |
稀释缓冲液 |
1瓶(30 mL) |
4-6℃ |
|
3 |
浓缩洗涤液(10X) |
1瓶(30 mL) |
4-6℃ |
|
4 |
酶标山羊抗鼠二抗 |
1瓶(20μL) |
-20℃ ~ -80℃ |
|
5 |
TMB显色液 |
1瓶(13 mL) |
4-6℃ |
|
6 |
终止液(2M,H2SO4) |
1瓶(8 mL) |
4-6℃ |
|
7 |
使用说明书 |
1份 |
|
操作步骤
- 将浓缩洗涤液(10X)用蒸馏水做10倍稀释,配制成工作洗涤液。
- 取出包被有HAMSTER LCMV抗原的96孔酶标板在室温平恒回温,在加样品前拆开密封的铝箔袋。
- 将待检样本用稀释缓冲液做1: 200稀释,100 μL/孔,加入各反应孔。(加样过程须在15 min内完成)。
- 置37℃恒温培养箱避光反应1 h,孵育完成后弃液,并用工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s,洗涤三遍,在无纤维纸上拍干。
- 根据待测样品数量取相应体积的酶标山羊抗鼠二抗并用稀释缓冲液1:1000倍稀释(现用现配),100 μL/孔,置37℃恒温培养箱避光反应1 h。工作洗涤液250 μL/孔洗涤90s,洗涤四遍,在无纤维纸上拍干。
- 用移液器加TMB底物显色液100 μL/孔(提前恢复至室温),37℃避光反应5 min,请勿震荡。
- 移液器加终止液50 μL/孔,稍微震荡5s混匀。
- 15min内用酶标仪450 nm波长处读数。
结果判定
实验结果需满足以下参数为成立:
阳性孔参考值:OD450 >0.100;阴性孔参考值:OD450 ≤0.100
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