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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 英文名:
pAAV-U6-MCS-shRNA-TBG-ZsGreen1
- 保质期:
3个月~12个月
- 供应商:
上海禾午生物有限公司
- 保存条件:
负20℃&负80℃
- 规格:
干粉&甘油菌
| 名称 | pAAV-U6-MCS-shRNA-TBG-ZsGreen1 |
| 别称 | - |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞,腺相关病毒 |
| 质粒用途 | 干扰沉默 |
| 片段类型 | shRNA |
| 片段物种 | 空载体 |
| 原核抗性 | Amp |
| 荧光标记 | 绿色 |
| 启动子 | U6 |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| 反向引物 | ZsGreen1-R1 |




| pAAV-U6-MCS-shRNA-TBG-ZsGreen1 |
| pAAVS1-TRE-COX8-mCherry-EF1a-rtTA-T2A-Puro |
| pAAV-U6-Tfeb(rat)-shRNA2-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2b(rat)-shRNA1-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2b(rat)-shRNA2-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Tfeb(rat)-shRNA3-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2b(rat)-shRNA3-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-ENO2(human)-shRNA2-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-ENO2(human)-shRNA3-ZsGreen1 |
| pAAV-CMV-FOXP3(human)-EGFP |
| pAAV-CMV-ENO2(human)-P2A-EGFP-3×FLAG |
| pAAV-U6-ENO2(human)-shRNA1-ZsGreen1 |
| pAAV-CMV-EGFP-Creb3l1(mouse)-3×FLAG |
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文献和实验启动子 怎么选 病毒载体?U6、CMV、CAG、hSyn 一文理清
场景 U6 III 型 Pol III shRNA/小 RNA 转录,干扰必备 CMV Pol II 广谱 体外多数细胞强表达,常用通用方案 CAG Pol II 广谱(强) 比 CMV 更稳更强的广谱表达,常用体内外 hSyn 神经元特异(Pol II) 神经元的特异表达,脑研究常用 CaMKIIα 神经元/突触特异(Pol II) 定位到神经元、尤其突触相关表达 GFAP 星形胶质细胞特异(Pol II) 胶质细胞方向,标记/操纵星形胶质细胞 TBG / hAAT 肝脏相关
AAV 三保一是什么?shRNA 体内敲低一次保一条有效靶点
靶点对比 设计要点 做法 为什么 多靶点并行 单基因设计 3 条独立 shRNA 覆盖单靶点的随机失效 区域分散 分别靶向 CDS / 3'UTR 等不同区段 避免 mRNA 折叠致全部失效 GC 适中 推荐 35%–55% 范围 平衡稳定性与特异性、优化加工 脱靶低 避开基因组同源区域 保证干扰特异性 载体适配 U6 Pol Ⅲ 驱动,经典 GV478 载体(U6-MCS-CAG-EGFP) 高效转录、被 Dicer 加工 判定标准 RT-qPCR ΔCt
该载体在大肠杆菌中的复制。 U6启动子是确保目的shRNA转录,个人觉得转染的shRNA表达载体应该具有真核复制起点吧?! 网上搜到一种RNAi载体pGO包含的序列:pUC复制起点pUCori、fl复制起点flori、细菌启动子P、卡那霉素基因Kan、HSV-TKPolyA、U6启动子U6promoter 和多克隆位点MCS,其特征在于还含有用于表达绿色荧光蛋白基因的转录元件,包括CMV启动子CMVpromoter、增强绿色荧光蛋白基因EGFP和 SV40PolyA
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