- ￥14
- 禾午生物
- P75719
- 国产
- 2025年08月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
pX601-GFP-U6-scramble-sgRNA1
- 保质期：
3个月~12个月
- 供应商：
上海禾午生物有限公司
- 保存条件：
负20℃＆负80℃
- 规格：
干粉＆甘油菌
| 名称 | pX601-GFP-U6-scramble-sgRNA1 |
| 别称 | - |
| 质粒宿主 | 哺乳细胞,腺相关病毒 |
| 质粒用途 | 基因编辑 |
| 片段类型 | CRISPR |
| 片段物种 | 小鼠 |
| 原核抗性 | Amp |
| 荧光标记 | 绿色 |
| 启动子 | U6 |
| 复制子 | pUC |
| 感受态 | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| 背景载体 | pX601-GFP |
| 正向引物 | U6-F |
| pAAV-U6-Ybx1(mouse)-shRNA2-ZsGreen1 |
| pAAV-CAG-Rnf138(mouse)-3×HA |
| pAAV-CAG-Suox(mouse)-3×HA |
| pAAV-CAG-Ufsp1(mouse)-3×HA |
| pAAV-TBG-Cre |
| pAAV-U6-Ybx1(mouse)-shRNA3-ZsGreen1 |
| pAAV-CAG-Rab5b(mouse)-3×HA |
| pAAV-ZsGreen1-Ifnar1(mouse)-shRNA1 |
| pX601-GFP-U6-scramble-sgRNA1 |
| pAAV-CMV-Peredox-mCherry |
| pAAV-U6-Mtrex(mouse)-shRNA1-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2c(mouse)-shRNA4-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2c(mouse)-shRNA5-ZsGreen1 |
| pAAV-U6-Htr2c(mouse)-shRNA6-ZsGreen1 |
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文献和实验9 in this chapter should be relevant for thesefuture efforts as well. 2 Materials 2.1 Molecular Biology Reagents 1. Backbone plasmids: pX330 (U6-chimeric guide RNA + CBh-SpCas9 backbone, Addgene ID 42230), pX335 (U6-chimericguide RNA + CBh-SpCas9n
使这两个结构域失活，就能得到一个保留了靶向 DNA 结合能力而无催化活性的 Cas9 蛋白 (dCas9)。 当 dCas9 与 sgRNA 在细菌中共表达，它们能结合在启动子上把 RNA 聚合酶挤开，从而使特定转录本表达量下降。(图源自维基) 而通过在 Cas9 上嵌合一些特定的效应分子，也许可以开发出更稳定高效的真核生物基因表达调控系统，比如转录阻遏子和激活子，通过 sgRNA 的引导到达相应的基因座。 在 dCas9 上融合 GFP 蛋白，就可以在活
9 的细胞上使用只带 gRNA 的病毒，结果完全没有编辑，却误以为是靶点问题。下单前务必确认宿主细胞是否表达 Cas9，以及表达是否有功能（做过阳性对照验证）。 --- 二、六个选型维度逐个看 1. 筛选标记 抗生素抗性（puromycin、blasticidin、hygromycin）：可富集被感染细胞，是稳转株构建的标配。要注意细胞对药物的敏感性需预先测定（做杀伤曲线），不同细胞系的耐受浓度差异很大。 荧光蛋白（GFP、mCherry）：便于流式分选和感染效率可视化，适合不能加药筛的场景
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