(Methylpyridazine-5-boronicaci

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

，枪头勿碰膜底，含沉淀先 0.22 μm 过滤，严格配平（差 ≤ 0.1 g）； 3.离心：≤ 4000 × g 离心 15–40 分钟，多数样品 20 分钟即可达标； 4.回收：立即用移液器吸出浓缩液；残留最后 50–100 μL 可加 100–200 μL 缓冲液吹打再吸，回收率提至 95% 以上； 5.换液：浓缩至原体积 1/3–1/2 → 加目标缓冲液混匀 → 再离心，重复 3 次以上置换率 > 99%。 红线：严禁超过最大安全离心力 5000 × g，离心全程必须严格配平，否则裂管、样品全

丁香园论坛关于柱压的几个问题

%甲醇各0.5小时，第二次开机时先用5%甲醇冲20分钟后再换流动相。柱压过高时可以采用低流速，长时间来冲。顺便提一句，流动相和样品都要严格过滤的！adashuishui：我的建议：1、如果你做最后一个样品的时候柱压还是正常的，那么可能就是冲柱出现了毛病。由于你的流动相采用了较大比例的缓冲盐，因而冲柱的时候要采用含水相较多的溶液低速冲洗，如果有机相的比例过高，磷酸二氢钾有可能结晶析出导致柱压升高。2、如果你做最后一个样品的时候柱压已经很高，那就是样品造成的。此时色谱柱的柱头已经遭到污染，因而需要清理

利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定

。 电喷雾对无机盐非常敏感，因此肽段样品上样之前必须进行脱盐处理。最有效的一种方法是使用反相高效液相色谱法（RP- HPLC) 。反相高效液相色谱法不仅可以去除盐类 ，而且还可以纯化和浓缩肽段样品。这就是为什么液相色谱- MS/MS (LC-MS/MS)是蛋白质组学中最常见的配制。由于电喷雾技术跟样品浓度高度相关，色谱柱的直径是主要参数，减少柱子的直径可以提高灵敏度 [7] 。目前用直径 50~100 μm 的纳米级色谱柱来提高质谱仪进样口的肽段浓度。此外，利用纳米级色谱柱将流量减少到 150~300