(Nitrobenzothioamide 26060-30

HPLC入门问题FAQ

段质量。 11.怎样在质谱的图谱上确定单一同位素峰和平均同位素峰? 在分辨率低的质谱图谱上，所显示的峰一般是平均同位素峰。但目前常用的质谱方法（比如 MALDI-TOF ）分辨率一般都很高，一般的小分子（比如肽段）常含有 4 到 5 个同位素峰，其中分子量最小的那个就是单一同位素峰。但是，当用质谱检测大分子（比如完整蛋白质）时，同位素峰的数目很多，难以在图谱上区分。在这种情况下，使用平均同位素质量会比较更有意义。 12.同位素峰之间一定是相差 1 Da 吗？ 同位素肽段的质量（m

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： 高压――压力可达150~300 Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。 高速――流速为0.1~10.0 ml/min。 高效――可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。 高灵敏度――紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。 HPLC与经典液相色谱相比有以下优点： 速度快――通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。 分辨率高――可选择固定相和流动相以达到最佳分离

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，引起分析误差。某些药物特别是碱性药物会被玻璃容器表面吸附，影响样品中药物的定量回收，因此必要时应将玻璃容器进行硅烷化处理。 3．记录时间：第一次测定时，应先将空白溶剂、对照品溶液及供试品溶液各进一针，并尽量收集较长时间的图谱（如30分钟以上），以便确定样品中被分析组分峰的位置、分离度、理论板数及是否还有杂质峰在较长时间内才洗脱出来，确定是否会影响主峰的测定。 4．进样量：药品标准中常标明注入10ml，而目前多数HPLC系统采用定量环（10ml、20ml和50ml），因此应注意进样量是否一致