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以非那西丁为探针采用高效液相色谱法快速测定细胞色素P450 1A2的酶活性

氨基酚的保留时间为2.85 min，线性范围为1.00～200 μmol・L-1（r=0.999 9），最低定量限（LLOQ）为1.00 μmol・L-1，回收率为99.8%～102.3%；非那西丁的保留时间为3.68 min，线性范围为1.00～200 μmol・L-1（r=0.999 9），最低定量限（LLOQ）为1.00 μmol・L-1，回收率为98.3%～101.1%。两者的日内、日间相对标准偏差均小于15%，温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论该方法快速、稳定、灵敏度高，适合体外非那

【资源】蛋白纯化经验指南（）

的填料,颗粒细点,起始盐浓度高点,这样保证能浓缩好你的样品. 35) 楼主：这段在用离子交换柱过抗体，请问抗体的吸收图谱是怎样的？它的特征吸收峰在哪里，不同的多克隆抗体是不是还有自己的特征吸收峰， 抱歉,你是说色谱图还是紫外吸收图呢,蛋白一般都是在280检测的呀,不同的的蛋白虽然有一点差别,但是那也不是很明显的,其实就用280就可以了. 36) 我的蛋白以GST融合蛋白的形式表达在E Coli中，分子量14~15kDa，蛋白的疏水性很强，等电点在7左右。菌破碎后，用表面活性剂提取的融合

蛋白纯化经验指南

，它能纯化不少脱氢酶和激酶。如果它可以你就不需要合成填料了，有现成的。我已经给你发了相关一些偶联的材料，请查收，现在一般要自己合成亲和填料，有很多公司都提供活化好的介质，自己偶联就可以，其中比较常用的有溴化氰琼脂糖凝胶，环氧琼脂糖凝胶，氨基琼脂糖凝胶，羧基琼脂糖凝胶，活化酯琼脂糖凝胶，以及巯基琼脂糖凝胶等，但是如果是小分子的配基最好选择有3-10碳作为手臂的活化介质为好，此外也曾经有文献报导固定辅酶时，偶联位置不同，选择性有差别，因此你可以选择自己适合的活化介质。不同的活化的介质对偶联的配基有不同的要求