2-氰基-N-环己基-N-甲基乙酰胺 2-Cyano-N-

高效液相色谱柱

一、怎样选择色谱柱现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。（1）硅胶基质填料：1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低

HPLC‐SEC Characterization of Membrane Protein‐Detergent Complexes

of BSA fractionated in buffers with different detergents. A TOSOH G4000SWxl column, 7.8 × 300 mm, was run in buffers with DM (n‐decyl‐β‐D ‐maltopyranoside), DDM (n‐dodecyl‐β‐D ‐maltopyranoside), CYMAL 7 (7‐cyclohexyl‐1‐pentyl‐β‐D ‐maltopyranoside

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

移（或电印迹）到膜上。 Cohen 及其合作者 [3] 建立了一种利用非固定负染（Cu 或 Zn 染色）和有机溶剂提取蛋白质的被动洗脱技术。脱色后，蛋白质条带被从胶上切下，粉碎，并在提取液 [ 方法 A，蚁酸/水/异丙醇，3 : 2 :  1 ( V/V/V ) ] 或 MALDI 基质溶液 [ 方法 B，如 4-羟基-α- 氰基肉桂酸溶液（4HCCA ) ] 中剧烈振荡几个小时。利用这种技术能够提取分子质量在 70 kDa 以下的蛋白质。这种技术成功的关键是使用了非固定金属负染色。这样可以避免