胞嘧啶5'-三磷酸二钠盐水合物 Cytidine5'-tr

流式细胞术应用 | 13 色淋巴亚群免疫功能检测

实验简介13 色淋巴亚群免疫功能检测，利用高度集成，卓越检测性能的 CytoFLEX 对外周血中高度异质的 T 淋巴细胞亚群进行分析，10 色 Duraclone IM T 细胞试剂盒 (CD45RA-FITC，CD197-PE，CD28-ECD，CD279-PC5.5，CD27-PC7，CD4-APC，CD8-Alexa-Fluor 700，CD3-APC-AF750，CD57-Pacific Blue，CD45-Krome Orange) 为贝克曼最新用于淋巴亚群检测的干粉试剂。加上

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（下）

]。 MSO要求预先设计一对含有2个不相邻的GC（或AC）的探针，用于识别甲基化和非甲基化的序列，其中含GC的探针（5[42]'---GC---GC---3'）识别甲基化序列，含AC的探针（5'---AC---AC---3'）识别非甲基化序列，探针的5'端通过Linker固定于玻璃板上。首先对待研究片段用重亚硫酸盐处理，将非甲基化的胞嘧啶变为尿嘧啶，甲基化的不变，再行PCR扩增，产物的3'端用荧光素标记，移至连有探针的玻璃板上进行杂交，通过检测杂交后产生的荧光强度判断待测序列中甲基化的水平。此方法一定

DNA甲基化研究方法的回顾与评价

1），行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶，最后,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法，能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态，但需要大量的克隆测序,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1：重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA经重亚硫酸盐处理后，甲基化的胞嘧啶不变，未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶 2.2.3 甲基化特异性的PCR（methylation-specific PCR, MS-PCR） Herman