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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
(3-Chloro-benzobthiophene-2-carbonyl)-amino-aceticacid
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
216985-67-0
- 规格:
10mg///100mg///200mg
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文献和实验转移酶重组蛋白的诱导 1. 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌BL21菌株于5mL LB液体培养基中(含100ug/mL 氨苄青霉素),37℃震荡培养过夜。 2. 转接1mL过夜培养物于100mL(含100ug/mL 氨苄青霉素)LB液体培养基中,37℃震荡培养至OD600 = 0.6 - 0.8。取10ul 样品用于SDS-PAGE 分析。 3. 加入IPTG至终浓度0.5 mmol/l, 37℃继续培养1-3h. 4. 12,000rpm 离心10 min, 弃上清,菌体
酶作用下连接入载体。4. 获得含重组表达质粒的表达菌种① 将连接产物转化大肠杆菌 DH5α,根据重组载体的标志(抗 Amp 或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。② 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确, 进入下步操作。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。③ 以此重组质粒 DNA 转化表达宿主菌的感受态细胞。5. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的诱导① 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌 BL21 菌株于 5 mL LB 液体培养基中(含 100
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