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      来起始DNA 的合成。cDNA 合成最常用的引物是与真核细胞mRNA 分子3'端poly(A)结合的12-18 核苷酸长的oligo(dT)。 三、cDNA 第二链的合成   cDNA 第二链的合成方法有以下几种: (1) 自身引导法合成的单链cDNA 3'端能够形成一短的发夹结构,这就为第二链的合成提供了现成的引物,当第一链合成反应产物的DNA:RNA 杂交链变性后利用大肠杆菌DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段或反转录酶合成cDNA 第二链,最后用对单链特异性的S1 核酸

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      、真空抽干所加入的洗脱。   13、 再加12ml柱子洗脱液进柱子并抽干。   14、 加入5ml 80%乙醇漂洗柱中的树脂, 柱子真空抽干后将柱子放入用户提供的离心管中,2500rpm(1300g)离心5分钟。   15、 取出柱子,真空抽干5分钟,再将柱子放入系统中所提供的离心管中,2500rpm(1300g)离心5分钟。   16、在柱子中加入1.5ml 65-70℃预热过的灭菌重蒸水或TE,1分钟后2500rpm(1300g)离心柱子/离心管5分钟。   17、 取出柱子,离心管中

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