5-氯-3-(三氟甲基)吡啶-2-醇 5-Chloro-3

（交流）【分享】柱层析

【分享】柱层析 极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统 极性较大的用甲醇：氯仿系统 极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸 硅胶柱层析 下面介绍我现在惯用的方法：匀浆法。 1。称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。 2。搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌

植物组织RNA提取的难点及对策

就必须有效地去除蛋白杂质。常规的方法是在冷冻的条件下研磨植物材料以抑制RNase等的活性；提取缓冲液中含有蛋白质变性剂，如苯酚、胍、SDS、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）等，这样在匀浆时可以使蛋白质变性，凝聚；有的方法是利用蛋白酶K来降解蛋白杂质。进一步可以用苯酚、氯仿抽提去除蛋白质。 另外，也可以利用蛋白质与RNA在高氯酸钠溶液中的溶解度不同将它们分离。在70%高氯酸钠溶液中，RNA的溶解度大于蛋白质的溶解度，因而将大部分蛋白质沉淀下来。接着在离心上清液中加入两倍体积的无水乙醇，这时RNA

组织标本的处理

。由于此缺点加之使组织收缩剧烈，很少单独使用；当与拮抗此缺点的试剂如醋酸，福尔马林，重铬酸钾等结合使用时，氯化汞仍是很多优良常规固定剂的一种成分。用氯化汞固定的组织使染色特别对胞浆着色比较鲜丽。 凡用含氯化汞的固定剂固定的组织如超过规定时间会使组织过度硬化，而难切薄片。组织内常存有汞盐，切片时能损伤切片刀，所以在脱水前应予以洗去。常用方法是用70%酒精加入少量碘（0.5%）浸洗，再进行充分的冲洗或以70%酒精洗后进行脱水。也可在切片染色前用含碘的70%酒精漂洗数分钟，再以5%硫代硫酸钠漂洗