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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
1-Boc-4-Nosylpiperazine
- 库存:
999
- 供应商:
智溯科ZSK
- CAS号:
1314988-05-0
- 规格:
10mg/100mg/9138mg
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文献和实验。我的蛋白是2KD,在做非还原电泳时,发现除了目的蛋白外,有二聚体和多聚体存在。目的蛋白占44%,余下大部分为二聚体和多聚体。但在做反相HPLC时,只出现两个峰,第一主峰占90%(目的蛋白的位置),出峰时间为13分钟,第二主峰占10%,出峰时间为3分钟。请问在做HPLC时,二聚体和多聚体是否发生改变?用此方法测定含有二聚体和多聚体存在的目的蛋白纯度,是否不妥?我用柱子是C4柱,5υm,300埃。流动相B用0.05%三氟乙酸的乙腈,流动相A用0.05%三氟乙酸的纯水。 我觉得蛋白的聚合应该和存在
。目的蛋白占44%,余下大部分为二聚体和多聚体。但在做反相HPLC时,只出现两个峰,第一主峰占90%(目的蛋白的位置),出峰时间为13分钟,第二主峰占10%,出峰时间为3分钟。请问在做HPLC时,二聚体和多聚体是否发生改变?用此方法测定含有二聚体和多聚体存在的目的蛋白纯度,是否不妥?我用柱子是C4柱,5υm,300埃。流动相B用0.05%三氟乙酸的乙腈,流动相A用0.05%三氟乙酸的纯水。 我觉得蛋白的聚合应该和存在的环境有很大的关系,但是即使如此,那聚合体在反相上能有这么大的差别
Marker也有助于判断转膜的效率和情况,如果比目标分子大的Marker都已经转过去了,那就OK了。 10. 有人说在中性条件下电泳有助于蛋白测序,如果要蛋白测序需要提前一天倒胶,并说预电泳6小时(有还原剂如Glycolate)后再倒积层胶。除了要做HPLC分析应该用丽春红S而不要用考马斯亮蓝或者氨基黑染色,其他的比如测序或者PTH都可以选灵敏度高些的考马斯亮蓝或者氨基黑。 11. 转印后的PVDF膜在含20%甲醇溶液中在白透射光照下不用染色也依稀可以看到透明的蛋白条带,有时这种快速的方法可以不用染色
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