N'-羟基-3,5-双(三氟甲基)苯并咪唑酰胺 N'-Hy

十 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS

介质进行蛋白质或核酸分离的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体（acrylamide，简称ACR）和交联剂N，N-甲叉双丙烯酰胺（N,N-methylene bisacrylsmide 简称BIS）在催化剂的作用下聚合交联而成的三维网状结构的凝胶。通过改变单体浓度与交联剂的比例，可以得到不同孔径的凝胶，用于分离分子量大小不同的物质。聚丙烯酰胺凝胶聚合的催化体系有两种：（1）化学聚合：催化剂采用过硫酸铵，加速剂为N,N,N,N－四甲基乙二胺（简称TEMED）。通常控制这二种溶液的用量，使聚合

手把手教你跑的一手好胶

，室温保存。脱色液在 90 ml 甲醇：水（体积比 1:1）和 10 ml 冰乙酸混合液用 0.45/0.22um 的膜抽滤，室温保存。1X Tris - 甘氨酸电泳缓冲液 （即 Running buffer）25 mmol/L Tris250 mmol/L 甘氨酸0.1%（m/V）SDS同样可以扩大配方为 5X 的储存液。30％ 丙烯酰胺混合液（100 ml）29.2 g 丙烯酰胺（Acr）0.8 g 亚甲基双丙烯酰胺（Bis）10 g SDS 外包锡纸，4℃ 冰箱保存二、制胶选择胶板（0.75

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

蛋白质的最佳洗脱时间。作为参考，以下给出了在 100 V 电压下，从 10% SDS-聚丙烯酰胺凝胶（聚丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺，29 : 1) 中洗脱出不同大小的蛋白质所需的最短时间（引自 Qbiogen) ( 表 27-2)。 ( 7 ) 电洗脱后，强烈建议将正负极翻转后再进行 30~60 s 电泳。这样可以使电洗脱/电泳过程中附着在电洗脱管薄膜上的蛋白质释放到电泳缓冲液中。通常这样会提高蛋白质产率，尤其在蛋白质上样量相对较低时。 ( 8 ) 不要让样品完全干燥，完全干燥后的蛋白质很难复溶