(-)-MDO-NPA盐酸盐 (-)-MDO-NPAHyd

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

损。 04 避坑要点 ▪沉淀必先去除：蛋白聚集体会不可逆堵膜，流速归零即报废；   ▪起始浓度≥ 1 mg/mL：过低会因膜吸附导致回收率骤降；浓缩倍数建议≤ 20×； ▪膜不可晾干：干燥后孔径改变、基本报废，暂不用须保湿 4 ℃ 存放； ▪非无菌产品：严禁高温高压灭菌、次氯-酸-钠消毒；表面消毒仅限 70% 乙醇短时处理； ▪高盐（> 500 mM）先稀释：缓冲液 pH 差 ≤ 1，防止蛋白沉淀； ▪一次性使用：科研发表、GMP/GLP 场景禁止复用，珍贵样本

【资源】蛋白纯化经验指南（）

时你们一般用多少柱床体积？10X够了吗？ 一般也就3-5个床体积吧，离子交换需要平衡体积大点也，10X足够了 101) 有个关于胰岛素精纯化的问题想向你请教，我已取得95%纯度样品。但杂质大于1%，进一步纯化，用什么柱子，具体操作又怎样做呢，谢谢赐教。 我知道，我好象回复过，你用反相硅胶10um的柱子1.0X25cm或者2.2X25cm的柱子做制备，这样可以达到99%以上的纯度，别的方法很难做到你需要的纯度，此外胰岛素也可以用等电点沉淀的办法去掉一些杂质。 HPLC制备你可以参考

蛋白纯化经验指南

沉淀，我用0.5%CHAPS助溶可勉强溶解部分，目的蛋白疏水性比较强。既然是疏水性很强你可以加点甘油或者乙二醇降低极性，这样溶解就会好得多，此外你也直接加2%的PEG这样也降低极性，同时保护你的蛋白，你再做纯化就可以了，我以前遇到这样的蛋白是用10%的乙醇加3-5%的PEG5000，这样的情况下蛋白还是活性回收率很高，我觉得那些表面活性剂能不用还是不用的好，你失去活性你可以监测一下提取，纯化，酶切到底哪里失去了活性，这样更容易解决你的问题。还有注意缓冲液PH值，看看改变它对溶解度有没有影响。蛋白