3,5-二溴苯硼酸 3,5-Dibromophenylbo

【资源】蛋白纯化经验指南（）

小鼠IgG、protein A－sepharose来做免疫沉淀，发现做完后跑电泳，出现了两条带，分别位于85KD、55KD左右，请问这会是什么东西？会是抗体吗？还有没有可能是目标蛋白变小了？ 抱歉,我没有做过免疫沉淀,但是抗体做过一些,抗体重链没有大到85KD的地步,所以应该不是抗体.会不会你的蛋白有四个部分构成,分别是两个85KD和55KD,这样分子量正好和你的250KD相当,你可以跑非还原电泳看看,是不是还这样呢.如果不是,那说明是由这两个部分组成的.都是由二硫键连接的. 32) 我提胰蛋白酶，主要参考

蛋白纯化经验指南

做过免疫沉淀，但是抗体做过一些，抗体重链没有大到85KD的地步，所以应该不是抗体。会不会你的蛋白有四个部分构成，分别是两个85KD和55KD，这样分子量正好和你的250KD相当，你可以跑非还原电泳看看，是不是还这样呢。如果不是，那说明是由这两个部分组成的。都是由二硫键连接的。 32）我提胰蛋白酶，主要参考用张龙翔书里的办法，先提卵类粘蛋白，首先过SEPHADEX G-25 柱子脱盐，然后过DEAE纤维素离子交换柱；第二步是用卵类粘蛋白合成SEPHAROSE-4B亲和柱。这些层析过程都可以在缓冲

原创:下游纯化简易讲义

（注射用降纤酶） 分子量：38 kD；等电点：~5.4 原工艺：阴离子交换，凝胶过滤，第二次阴离子交换，凝胶过滤 达到95%以上纯度，产量6000-10000单位/克蛇毒。(两周) 新工艺：亲和色谱，阴离子交换，凝胶过滤，亲和色谱（一周） 纯度达到98.5%以上，产量达20000-25000单位/克蛇毒。 尖吻蝮蛇毒经过五个步骤的分离纯化后，获得了单成分降纤酶组分，电泳为一条带，HPLC为单峰。 如上图所示，由于每一个步骤均会带来一定的损失，故在可能的情况下应尽量减少下游纯化的步骤