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Invitrogen™ Neon™ NxT电转染系统

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  • 2025年08月04日
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      赛默飞世尔科技

    Invitrogen™ Neon™ NxT电转染系统是新一代电转染平台,它采用创新设计,极大简化了哺乳动物的细胞转染流程。Neon NxT专有的移液器吸头技术通过最.大化两个电极之间的距离,同时最小化其表面积,保证样本具有:

    • 更均匀的电场

    • 更少的离子形成

    • 更小的pH变化

    • 可忽略不计的发热

    从而实现卓越的电转染效率和细胞活率。 操作简单,仅需 3 个步骤:吸样、电转染和分液即可完成。

    使用Neon NxT电转染系统,您可以获得:

    1、可靠的性能

    Neon NxT 电转染系统在极难转染的细胞(包括免疫细胞、原代细胞和干细胞)中实现高达 90% 的转染和基因编辑效率。150 多个细胞株已在经过优化的即用条件下进行了转染效率和细胞活率测试。

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    图2. Neon NxT电转染系统的转染效率。在10 µL或100 µL电转染反应中,采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。转染效率为GFP阳性细胞的百分比(n=3)。注:Native T细胞仅在100 µL反应中进行电转。

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    图3. Neon NxT系统电转后的细胞活率。在10 µL或100 µL电转反应中,采用GFP质粒DNA或GFP mRNA转染细胞。用Invitrogen™ SYTOX™红色死细胞染色剂对转染细胞进行染色,并在Invitrogen™ Attune™ NxT流式细胞仪上评估细胞活率。细胞活率(%)以3次测量的平均值报告。注:初始T细胞仅 在100 µL反应中进行电转。

    2、节省研究时间

    通过简单的三步工作流程快速转染细胞,选择 1 通道移液器或 8 通道移液器,15 分钟内进行96 次转染反应,并具有孔板模式的直观用户界面。

    采用 Neon NxT 8 通道移液器,我们可将灵活性提升至非常高的水平。8 通道移液器的每个吸头在其分离管内独立运行,能够使用不同的电转染参数,重悬缓冲液,递送物甚至是细胞类型。此外, Neon NxT 8 通道移液器和工作站可与现有的 Neon NxT 设备配合使用,也可使用相同的 Neon NxT 吸头和缓冲液。无论您是优化条件还是探索多种变量, Neon NxT 8 通道移液器都能提供加速研究并获得更可靠结果所需的多功能性。

    使用 Neon NxT 8 通道移液器,每个通道都可以处于不同条件下,可以在单次实验中高效测试各种参数,极大地提高研究通量和精度。这种简化的方法可进行快速而准确的优化,确保实验的高效率和细胞存活率(图 4)。

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    图4. Neon NxT 转染程序优化研究。我们评估了 Jurkat 细胞中 11.5 kb GFP 质粒转染的最佳电转程序和重悬缓冲液。每个数据点代表特定电转程序,显示了 GFP 阳性细胞在电转染后 24 小时与活转染细胞总数 (TTC) 的百分比。红色圈突出显示性能最佳的条件,使用 T 缓冲液可实现高达 85% 的转染效率。

     3、提高基因编辑效率

    Neon NxT 电转染系统试剂盒配套重悬基因编辑缓冲液可以帮助提高基因编辑性能,使用 CRISPR Cas9 等特定物质进行哺乳动物细胞(包括原代细胞、干细胞和难以转染的细胞)的基因敲除或基因敲入实验。

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    图 5. Neon NxT 重悬基因编辑缓冲液在基于 CRISPR-Cas9 的基因编辑实验中的性能。在 10 μL 或 100 μL 反应中电转细胞。(A) 以 GFP 阳性细胞百分比表示的 GFP 供体 DNA 基因敲入效率。(B) GFP 供体 DNA 敲入后细胞的存活率。(C) 以电转后不表达 GFP 的初始 GFP 阳性细胞百分比表示的基因敲除效率。(D) 电转后基因敲除细胞的存活率。

     4、灵活易用

    采用 Neon NxT 电转染系统,可以精确地控制重要的实验参数,无需浪费宝贵的时间去调整不重要的参数。

    使用 Thermo Fisher Connect 上 的Invitrogen ™ TransfectionLab ™基于云的应用程序优化电转染参数,提高生产率和可追溯性。在输入详细实验信息后,将会生成从设计阶段开始为您的实验量身定制的分步指南。

    5、节省珍贵的样本

    Neon NxT 电转染系统的电转染过程发生在移液器吸头内,而非比色皿内,最.大程度地减少样本损失和细胞承受的剪切力。

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