气管上皮细胞-鸡

【求助】关于鸡肝脏细胞

queeniee 有木有做细胞的同学可以出来指导一下呀？要做鸡肝脏的体外细胞实验，需要研究激素对肝脏某些基因的表达情况的影响，可是应该取多大同龄的鸡的肝脏合适呢？？？？多大同龄后是鸡肝脏中的生理状态开始趋于稳定呢？急！！！！！求助！！！！如果有相关的参考文献可以分享一下话也会十分感谢的，谢谢大家！期待回贴呀！！！！ 洛阳双螺旋 queeniee wrote: 有木有做细胞的同学可以出来指导

鸡卵泡颗粒细胞分离、培养

缓冲液的无菌培养皿中； B. 用加有双抗的PBS缓冲液冲去血污，漂洗3次；将漂洗干净的卵泡移入装有预冷PBS缓冲液的平皿中，剥净卵泡外膜、结缔组织及血管网； C. 用手术刀在卵泡表面划一道1-2cm长的切口（动作要快），释放卵黄，用PBS缓冲液将剩余的卵黄液漂洗干净，剩下的卵泡膜即为：基膜和卵泡颗粒细胞层；D. 将漂洗干净的卵泡膜尽量剪碎，置于15mL离心管中，加4mL培养基，用1mL移液枪反复吹打1min，自然沉降5min，收集上清液备用； E. 向离心管内加入4mL

正常人支气管上皮细胞培养

完成后，200rpm/min离心2min，小心倾去消化液，再加入组织块4-5倍体积胶原酶Ⅱ，37℃水浴中消化1h，不时震荡； 9. 消化完成后震荡离心管3次，之后静置5min，待较大的组织块沉降至管底后，小心吸出上层悬液（如吸出的悬液中絮状或块状的组织较多，可考虑过200目网筛去除），转入另一离心管中； 10. 1000rpm/min离心5min，倾去上层液体，加入培养基重悬细胞，转入6孔板中，置于37℃、5%CO2 的培养箱中培养。