Human Indoleamine 2,3-Dioxygen

英文名称：Human Indoleamine 2,3-Dioxygenase/IDO1 ELISA KIT

中文名称：人吲哚胺2,3-双加氧酶

产品货号：JEH-373

厂 家: 安徽巧伊

贮藏温度：2～8°

有效期： 6个月

IDO 简介：

IDO作为肝脏以外催化色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢唯一的限速酶。其最早由Osamu Hayaishis研究组在兔的肠道中发现，还广泛分布于人和动物(如大鼠等)除肝脏以外的组织中，特别是在抗原提呈细胞和胎盘组织。IDO广泛表达于树突状细胞、巨噬细胞、小胶质细胞、嗜酸性粒细胞、成纤维细胞、内皮细胞和大多数肿瘤细胞中。在免疫细胞中，其表达主要受IFN-γ、IFN-α、IFN-β、IL-10等细胞因子的诱导。IDO在分解代谢色氨酸过程中，可以以超氧阴离子(0-2)作为辅助因子，酶解咯环，代谢多种吲哚胺的衍生物(色氨酸、色胺等)，但L色氨酸是其最适底物。人IDO的相对分子质量约42 000，由403个氨基酸组成。

健康人体中IDO表达水平较低，但在机体处于感染、炎症时，在脂多糖(LPS)、IFN-Y等细胞因子的作用下其表达可明显增加。IDO在多种肿瘤组织中均有较高的表达，其高表达是导致肿瘤免疫耐受的原因之一与肿瘤患者的预后较差关系密切。脂多糖和多种细胞因子等物质可调节IDO的表达，最近的研究表明，IDO在感染、妊娠、移植、自身免疫和肿瘤发生时诱导免疫抑制。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IDO的浓度。IDO捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IDO会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IDO抗体后，抗人IDO抗体与IDO接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在IDO将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IDO浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IDO浓度。

人IDO参考标准曲线

注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。

灵敏度，特异性和重复性:

1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为194pg/ml。

2.特异性：与人的IDO2，IFN-γ，Kynureninase，TDO2及小鼠的IDO无交叉反应性。

3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.

参考文献:

1. Xu, H. et al. (2008) Immunol. Lett. 121:1.
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4. Taylor MW, Feng GS. |J.FASEB J,1991,5(1): 2516-2522

5、Lewis-Ballester, A. et al. (2009) Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 106:17371.

6、Takikawa O. |J].Biochemical and BiophysicalResearch Communication，2005，338(1:12-19.