- ￥167
- 经科
- JK-578
- 国产
- 2025年12月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100T
产品简介
支原体污染会对细胞各个方面都造成不良影响，已经成为细胞培养中高度重视的问题，因此，定期进行支原体污染检测是十分必要的。本支原体检测试剂盒采用 PCR 方法，特异性的检测各种培养细胞生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）中支原体的污染。试剂盒使用的混合引物是针对支原体 16s rRNA 序列的保守区域设计的特异性引物，可直接使用细胞培养液作为 PCR 模板，特异性扩增支原体 DNA。使用本产品一小时内即可完成检测，检测灵敏度高，可检测低至20 个拷贝的支原体。
产品组分
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
|
JK-578-1 |
Mycoplasma PCR Mix（2×） |
1 mL |
|
JK-578-2 |
Mycoplasma Primer Mix |
200 μL |
|
JK-578-3 |
Positive Control |
50 μL |
|
JK-578-4 |
Mycoplasma Free Water |
1 mL |
使用方法（仅供参考）
1、样品准备：取适量待检细胞培养上清于洁净的PCR管中，利用PCR仪 95℃热处理 5 min 后作为模板。血清样本可利用 Mycoplasma Free Water稀释后，取适量样本于洁净的PCR管中，利用 PCR 仪 95℃热处理 5 min 后作为模板；
2、PCR体系配制：每次实验需设置阴性对照（将1μL待检样品换成等量的 Mycoplasma Free Water）与阳性对照（在1μL待检样品中加入0.5μL Positive Control 后一起作为Template），实验时戴一次性口罩与手套，谨慎操作，防止操作不当引入外源支原体污染；
|
组分 |
20ul体系 |
|
Template |
1 μL |
|
Mycoplasma Primer Mix |
2 μL |
|
Mycoplasma PCR Mix（2×） |
10 μL |
|
Mycoplasma Free Water |
补至 20 μL |
3、PCR程序设置
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步骤 |
温度 |
持续时间 |
循环数 |
|
预变性 |
98℃ |
2 min |
1 |
|
变性 |
98℃ |
20 s |
30 |
|
退火 |
56℃ |
25 s |
|
|
延伸 |
72℃ |
10 s |
|
|
延伸数据采集 |
72℃ |
5 min |
1 |
4、凝胶电泳：取10μL PCR产物，使用 1%琼脂糖凝胶进行电泳检测；
5、结果分析：每次实验通过与阴性对照、阳性对照检测结果比较确认样品支原体污染情况，阳性条带大小500bp左右。如阴性对照检测结果中有条带很有可能是PCR体系中出现污染，建议重新实验确认结果。如有必要，也可对PCR产物进行常规测序，以确定具体的支原体种属。
保存条件
-20℃保存，一年有效。
注意事项
1、本试剂盒可以检测 M. orale，M. arginini，M. bovis，M. fermentans，M. gallisepticum，M. hominis，M. pirum，Ureaplasma spp，M. hyorhinis，M. pneumoniae，A. laidlawii 等至少 11 种以上支原体污染。
2、所有试剂在使用前于冰上彻底解冻、混匀，使用完毕后于-20℃保存。
3、每次实验必须设置阴性对照、阳性对照，实验组建议设置样品模板梯度。
4、操作时必须佩戴口罩，严格按照 PCR 操作标准，防止引入外源污染影响实验结果。
5、为了确保细胞实验的可靠性及稳定性，建议定期进行支原体污染检测。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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