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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T
产品简介
本试剂盒用于从培养细菌中提取蛋白,其中的裂解缓冲液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,提取过程简便高效。获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。
产品组分
|
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
保存条件 |
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JK-545-1 |
Lysis Buffer |
50ml |
2-8℃ |
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JK-545-2 |
蛋白酶抑制剂混合物 |
50µl |
-20℃ |
|
JK-545-3 |
1M DTT |
50µl |
-20℃,避光 |
|
JK-545-4 |
PMSF(100mM) |
500µl |
-20℃ |
使用方法(仅供参考)
1、菌液离心收集菌体后,用PBS将菌沉淀重悬洗涤2~3次;
2、Lysis工作液配制:1ml冷Lysis Buffer加1µl蛋白酶抑制剂、1µl DTT和10µl PMSF混匀,冰上保存待用;
3、按原菌液体积1/5~1/10加入Lysis工作液重悬菌体,4℃孵育10min;冰浴超声(超声条件可参考:300w,超声10s,停止10s,共20min,至超声完全,具体可视实际情况而定);如无超声条件可反复冻融3次;
注意:判断是否超声完全方法:(1)外观判断:超声前菌悬液浑浊,超声完全后变得透明、清澈。(2)液体的粘滞性:超声后菌液从枪头滴下不粘连。(3)高速离心(一般用6,000g 10min),沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体。(4)染色:破碎后的菌液涂片,革兰氏结晶紫溶液染色0.5min,镜检。
4、4℃,14000rpm离心10min,收集上清为蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5、蛋白提取物分装保存于-70℃,避免反复冻融。
保存条件
-20℃保存,1年有效。
注意事项
1、所有接触样品的用具及试剂均需预冷。
2、提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。
3、如果超声时出现黑色沉淀,说明超声功率太强。
4、超声时间太长、功率太高对蛋白活性会有影响。
5、超声时尽量防止泡沫的产生。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
以下操作按照天根产品 DP433 血液总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生化科技
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP419) ——植物
以下操作按照天根产品 DP419 RNAsimple 总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 氯仿3. 移液器及配套 RNase-free 无菌枪头(200 μl ,1ml),1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液 RD、漂洗液 RW 中
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