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细菌蛋白提取试剂盒

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  • ¥410
  • 经科
  • JK-545
  • 国产
  • 2025年12月05日
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    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海经科化学科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      50T

    产品简介

    本试剂盒用于从培养细菌中提取蛋白,其中的裂解缓冲液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,提取过程简便高效。获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。

    产品组分

    产品编号

    产品名称

    规格

    保存条件

    JK-545-1

    Lysis Buffer

    50ml

    2-8℃

    JK-545-2

    蛋白酶抑制剂混合物

    50µl

    -20℃

    JK-545-3

    1M DTT

    50µl

    -20℃,避光

    JK-545-4

    PMSF(100mM)

    500µl

    -20℃

    使用方法(仅供参考)

    1、菌液离心收集菌体后,用PBS将菌沉淀重悬洗涤2~3次;

    2、Lysis工作液配制:1ml冷Lysis Buffer加1µl蛋白酶抑制剂、1µl DTT和10µl PMSF混匀,冰上保存待用;

    3、按原菌液体积1/5~1/10加入Lysis工作液重悬菌体,4℃孵育10min;冰浴超声(超声条件可参考:300w,超声10s,停止10s,共20min,至超声完全,具体可视实际情况而定);如无超声条件可反复冻融3次;

    注意:判断是否超声完全方法:(1)外观判断:超声前菌悬液浑浊,超声完全后变得透明、清澈。(2)液体的粘滞性:超声后菌液从枪头滴下不粘连。(3)高速离心(一般用6,000g 10min),沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体。(4)染色:破碎后的菌液涂片,革兰氏结晶紫溶液染色0.5min,镜检。

    4、4℃,14000rpm离心10min,收集上清为蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

    5、蛋白提取物分装保存于-70℃,避免反复冻融。

    保存条件

    -20℃保存,1年有效。

    注意事项

    1、所有接触样品的用具及试剂均需预冷。

    2、提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。

    3、如果超声时出现黑色沉淀,说明超声功率太强。

    4、超声时间太长、功率太高对蛋白活性会有影响。

    5、超声时尽量防止泡沫的产生。

    6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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