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详询
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88
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
50ml
胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂,52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。采用常规FBS进行细胞培养时,EV群体中将引入外源FBS来源EV和其他纳米粒子(如蛋白质/生长因子聚集体、核酸),污染细胞来源的EV,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性。因此,恩泽康泰ExoCCM ® 无外泌体血清—重磅上线,致力于解决不耐受无血清培养的细胞系外泌体研究难题。
概述
1)为什么使用无外泌体血清? 胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂, 52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析 ,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。
FBS 中富含有胎牛来源的细胞外囊泡EVs,其含量远高于细胞所释放的EVs。如果用常规FBS添加到培养基中,在EVs分离后,将得到包含来自培养细胞和添加了FBS条件培养基CCM来源的EV(以及可能的其他纳米粒子)的混合物,且FBS来源的EVs盖过了细胞来源EVs,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性和可靠性。 2 )无外泌体血清真的完全没有外泌体吗? 您可能会好奇FBS中到底有多少EVs,去除后大概水平是多少?文献中总结了一下数据,去除前一般FBS中至少含有2*10^10次方数量级的颗粒数,通过18小时超离或者过滤截留等方法,可以去除至少70%以上的颗粒,去除后平均水平约为5*10^10颗粒数。确实是没有办法完全去除外泌体,只能说尽量减少FBS EVs的残留水平。这也提示我们有必要用添加了FBS的培养基提取EVs,作为对照处理细胞进行对比研究。
参考文献:Foetal bovine serum influence on in vitro extracellular vesicle analyses. J Extracell Vesicles . 2021;10(3):e12061.
规格
| 货号 | 规格 | 产地 | 保存条件 | 试用装 |
|---|---|---|---|---|
| EDFBS50 | 50ml | 新西兰 | -20℃,有效期5年。4℃保存通常不宜超过1个月。 | 货号EDFBS5,规格5ml |
应用
针对不耐受无血清培养的细胞系,又想开展外泌体研究: 1)直接替代常规FBS使用: 建议将常规完全培养基中的FBS替换为ExoCCMTM无外泌体血清(货号EDFBS50),添加比例保持不变。注意:只替换血清,不要把培养基和其他成分也换了,需要控制变量进行比较。如果换成无外泌体血清后细胞生长较慢,可以适当增加无外泌体血清的添加比例。 2)先用常规FBS再替换无外泌体血清: 对于贴壁细胞汇合密度在70%以上,悬浮细胞培养到最大培养密度的60%-70%,用PBS洗涤细胞2-3遍以去除残留的牛血清FBS,再添加含无外泌体血清(如EDFBS50)的培养基,继续培养24小时或合适时间。(注意:只替换血清,不要直接把培养基和其他成分也换了。)
优势
本产品经过14项基本质控,确保产品质量: 1. 高安全性:确保内毒素、无菌、无支原体、无牛源病毒等安全性指标合格;
| NO. | Inspection items 检测项目 | Standard requirement 标准要求 | Test results 检测结果 | Conclusion 结论 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 种属鉴别(免疫扩散法) | 仅与抗牛的血清或血浆产生沉淀线,与抗人、猪、马、羊血清或血浆不产生沉淀线 | 仅与抗牛的血浆产生沉淀线 | PASS 合格 |
| 2 | 外观 | 应为略粘稠、淡黄色、黄色澄明液体,不应出现浑浊、溶血或异物 | 淡黄色澄明、稍粘液体,无溶血、析出物和异物 | PASS 合格 |
| 3 | 装量 | 应不低于5mL | 5.1mL | PASS 合格 |
| 4 | 渗透压摩尔浓度 | 250~330 mOsmol/kg | 289 mOsmol/kg | PASS 合格 |
| 5 | pH值 | 7.0~8.5 | 7.5 | PASS 合格 |
| 6 | 总蛋白 | 35~50 g/L | 29.1 g/L | PASS 合格 |
| 7 | 血红蛋白 | ≤200 mg/L | 19 mg/L | PASS 合格 |
| 8 | 内毒素 | ≤5 EU/mL | ≤0.25 EU/mL | PASS 合格 |
| 9 | BVDV抗原 | 阴性 | 阴性 | PASS 合格 |
| 10 | 无菌试验 | 阴性 | 阴性 | PASS 合格 |
| 11 | 支原体培养 | 阴性 | 阴性 | PASS 合格 |
| 12 | 噬菌体培养 | 阴性 | 阴性 | PASS 合格 |
| 13 | 细胞增殖检查(Raw264.7) | 细胞形态正常;细胞倍增时间不高于25小时 | 正常;18.1小时 | PASS 合格 |
| 14 | NTA | 不超过 3E+9 particles/mL | 1.3E+9 particles/mL | PASS 合格 |
| Test results 检测结果 | PASS 通过 |
2. 低EVs颗粒残留:

3. 不影响细胞正常生长:

引用文献
1、Dual-Confined engineering boosts Cas12a efficiency for precise single exosome-based breast cancer diagnosis. Chemical Engineering Journal. Volume 517 , 1 August 2025, 164318 IF=13.2 1区

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文献和实验。 4、培养细胞时,如何去除血清来源的外泌体? 多数情况下,细胞在体外培养时需要血清,而血清中一般都含有外泌体,为避免血清对细胞外泌体的污染,可采用以下两种方法: 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体; 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清(或者外泌体专用培养基)在什么时候使用? 使用无外泌体血清培养基:细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞汇合度在60% - 70% 时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基,继续
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