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【ExoCCM®细胞培养】无外泌体血清

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  • ¥1995
  • 恩泽康泰
  • EDFBS50
  • 2026年06月07日
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      88

    • 供应商

      广州市左克生物

    • 规格

      50ml

    胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂,52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。采用常规FBS进行细胞培养时,EV群体中将引入外源FBS来源EV和其他纳米粒子(如蛋白质/生长因子聚集体、核酸),污染细胞来源的EV,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性。因此,恩泽康泰ExoCCM ® 无外泌体血清—重磅上线,致力于解决不耐受无血清培养的细胞系外泌体研究难题。

     

    概述

    1)为什么使用无外泌体血清? 胎牛血清FBS是细胞培养中的常见添加剂, 52%的ISEV受访者使用含血清的培养基进行下游EV分析 ,其中59%和57%的受访者分别进行了体外和体内功能研究。

    FBS 中富含有胎牛来源的细胞外囊泡EVs,其含量远高于细胞所释放的EVs。如果用常规FBS添加到培养基中,在EVs分离后,将得到包含来自培养细胞和添加了FBS条件培养基CCM来源的EV(以及可能的其他纳米粒子)的混合物,且FBS来源的EVs盖过了细胞来源EVs,从而混淆体外和体内分析,影响检测结果的真实性和可靠性。 2 )无外泌体血清真的完全没有外泌体吗? 您可能会好奇FBS中到底有多少EVs,去除后大概水平是多少?文献中总结了一下数据,去除前一般FBS中至少含有2*10^10次方数量级的颗粒数,通过18小时超离或者过滤截留等方法,可以去除至少70%以上的颗粒,去除后平均水平约为5*10^10颗粒数。确实是没有办法完全去除外泌体,只能说尽量减少FBS EVs的残留水平。这也提示我们有必要用添加了FBS的培养基提取EVs,作为对照处理细胞进行对比研究。

    参考文献:Foetal bovine serum influence on in vitro extracellular vesicle analyses. J Extracell Vesicles . 2021;10(3):e12061.

    规格

    货号 规格 产地 保存条件 试用装
    EDFBS50 50ml 新西兰 -20℃,有效期5年。4℃保存通常不宜超过1个月。 货号EDFBS5,规格5ml

    应用

    针对不耐受无血清培养的细胞系,又想开展外泌体研究: 1)直接替代常规FBS使用: 建议将常规完全培养基中的FBS替换为ExoCCMTM无外泌体血清(货号EDFBS50),添加比例保持不变。注意:只替换血清,不要把培养基和其他成分也换了,需要控制变量进行比较。如果换成无外泌体血清后细胞生长较慢,可以适当增加无外泌体血清的添加比例。 2)先用常规FBS再替换无外泌体血清: 对于贴壁细胞汇合密度在70%以上,悬浮细胞培养到最大培养密度的60%-70%,用PBS洗涤细胞2-3遍以去除残留的牛血清FBS,再添加含无外泌体血清(如EDFBS50)的培养基,继续培养24小时或合适时间。(注意:只替换血清,不要直接把培养基和其他成分也换了。)

    优势

    本产品经过14项基本质控,确保产品质量: 1. 高安全性:确保内毒素、无菌、无支原体、无牛源病毒等安全性指标合格;

    NO. Inspection items 检测项目 Standard requirement 标准要求 Test results 检测结果 Conclusion 结论
    1 种属鉴别(免疫扩散法) 仅与抗牛的血清或血浆产生沉淀线,与抗人、猪、马、羊血清或血浆不产生沉淀线 仅与抗牛的血浆产生沉淀线 PASS 合格
    2 外观 应为略粘稠、淡黄色、黄色澄明液体,不应出现浑浊、溶血或异物 淡黄色澄明、稍粘液体,无溶血、析出物和异物 PASS 合格
    3 装量 应不低于5mL 5.1mL PASS 合格
    4 渗透压摩尔浓度 250~330 mOsmol/kg 289 mOsmol/kg PASS 合格
    5 pH值 7.0~8.5 7.5 PASS 合格
    6 总蛋白 35~50 g/L 29.1 g/L PASS 合格
    7 血红蛋白 ≤200 mg/L 19 mg/L PASS 合格
    8 内毒素 ≤5 EU/mL ≤0.25 EU/mL PASS 合格
    9 BVDV抗原 阴性 阴性 PASS 合格
    10 无菌试验 阴性 阴性 PASS 合格
    11 支原体培养 阴性 阴性 PASS 合格
    12 噬菌体培养 阴性 阴性 PASS 合格
    13 细胞增殖检查(Raw264.7) 细胞形态正常;细胞倍增时间不高于25小时 正常;18.1小时 PASS 合格
    14 NTA 不超过 3E+9 particles/mL 1.3E+9 particles/mL PASS 合格
      Test results 检测结果   PASS 通过  

    2. 低EVs颗粒残留:

    产品细节图片1

    3. 不影响细胞正常生长:

    产品细节图片2

    引用文献

    1、Dual-Confined engineering boosts Cas12a efficiency for precise single exosome-based breast cancer diagnosis. Chemical Engineering Journal. Volume 517 , 1 August 2025, 164318 IF=13.2 1区

    图示

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