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现货
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一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
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-20℃
- 规格:
0.2ml
产品简介
Actin-Tracker Red-594是一种Actin红色荧光探针,可以用于培养细胞或组织切片的Actin特异性荧光染色。Actin-Tracker Red-594探针为荧光染料Alexa Fluor 594标记的鬼笔环肽,最大激发波长为581nm,最大发射波长为609nm。Actin-Tracker Red-594的荧光光谱和Texas Red比较接近,可以用Texas Red的检测条件进行检测。
Actin-Tracker Red-594探针很小,直径大约为1.2~1.5nm,分子量小于2000Da,与F-actin结合后不影响与多种肌动蛋白结合蛋白结合。本探针标记后的肌动蛋白丝仍旧保持功能,标记的肌纤维能够收缩,标记的肌球蛋白可以继续移动,基本不影响F-actin的功能。在各种植物细胞或动物细胞中,本探针对大、小微丝具有相似的亲和力,每个肌动蛋白可以结合一个鬼笔环肽分子,因此本探针也可用于对细胞中F-actin进行定量研究。另外本产品的结合力在不同物种间没有显著变化,适用性广泛。
使用方法
1、用PBS洗涤细胞或组织切片2次。
2、用PBS配制的3.7%甲全溶液室温固定细胞或组织切片约10-20分钟。
注意:甲醇可以破坏actin,因此不能选用含有甲醇的固定液,并且尽量使用不含甲醇的甲全。
3、用含0.1% Triton X-100的PBS洗涤2-4次,每次5分钟。
4、用含有1-5%BSA和0.1% Triton X-100的PBS按照1:40-200的比例稀释Actin-Tracker Red-594,例如5µl Actin-Tracker Red-594用0.2ml或1ml稀释液稀释,稀释后的溶液即为染色工作液。稀释比例可以根据实际染色效果进行适当调整。
5、把染色工作液按照每个片子200µl的比例滴加到片子上,室温避光孵育30-60分钟。为防止蒸发,孵育时最好将片子置于载玻片染色盒中。
注意:对于培养于多孔板板中的细胞,染色方法可以参考组织切片的染色方法进行。
6、用含0.1% Triton X-100的PBS洗涤2-4次,每次5分钟。
7、随后可以直接用荧光显微镜进行观察。
8、为长期保存,可以在片子自然干燥后封片并于4ºC避光保存,保存时间可长达6个月左右。
保存条件
-20℃避光保存,一年有效。
注意事项
1、为避免反复冻融,建议适当分装。
2、对于微量的液体,每次使用前先离心数秒钟,使液体充分沉降到管底。
3、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4、鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量LD50约2mg/kg)。
5、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
. Directions for preparation of the DNaseI column are below in Appendix . Day 1 Extraction of Actin from Chicken Brain (large scale prep from tissue) 1. Homogenize tissue (fresh or frozen) in 1X Extraction Buffer without detergents at a ratio of 100
上面的图可见,与Cy2相比还是偏弱,而Dylight 488则更胜一筹;右上图是不同荧光团在含有90%甘油的PBS里的荧光淬灭情况,由图可见。FITC的淬灭都很快,Cy2其次,而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光稳定性。下面再看另一组有关于红色荧光的数据: 由左上图可见,Dylight 594比Alexa 594和Texas Red的荧光强度都要强,Dylight 594的特异性也很好;同样,右上图显示Dylight 594的光稳定性也很优异
【共享】荧光二抗的选择——Dylight荧光与传统荧光标记的比较
则更胜一筹;右上图是不同荧光团在含有90%甘油的PBS里的荧光淬灭情况,由图可见。FITC的淬灭都很快,Cy2其次,而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光稳定性。下面再看另一组有关于红色荧光的数据: 由左上图可见,Dylight 594比Alexa 594和Texas Red的荧光强度都要强,Dylight 594的特异性也很好;同样,右上图显示Dylight 594的光稳定性也很优异。那么Dylight到底是一种什么样的荧光团?不管在结构以及功能和应用上,Dylight都是
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