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Fura-2 AM (钙离子荧光探针, 2mM) JK-36

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  • 经科
  • JK-361
  • 国产
  • 2025年12月12日
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    • 保质期

      6个月

    • 供应商

      上海经科化学科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      50ul

    产品简介

    Fura-2 AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一,是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM 的荧光比较弱,最大激发波长为 369 nm,最大发射波长为 478 nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fura-2,从而被滞留在细胞内。Fura-2 和钙离子结合后,最大激发波长为 335 nm (最大激发波长随离子浓度的不同而有所不同),最大发射波长为 505 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 340 nm,发射波长为 510 nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为 340 nm 和 380 nm。

    本产品是配制于无水DMSO中的储存液,浓度为2mM。

    使用方法(仅供参考)

    1.Fura-2 AM工作液的配制:用HBSS稀释Fura-2 AM溶液,制备1-5µM的Fura-2 AM工作液。

    注:工作液现配现用;具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性,建议在取得有效结果的基

    础上尽量使用最低探针浓度。

    2.对于待检测的培养细胞,除去培养基,使用HBSS缓冲液洗涤细胞3次。

    3.将Fura-2 AM工作液加入细胞,加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养15-60 min,然后除去Fura-2 AM工作液。

    注:如果是首次实验不能确定孵育条件,建议先尝试 37℃孵育30分钟,观察荧光效果。如果细胞死亡较多,则适当缩短时间;

    如果荧光强度太弱,则适当延长时间。

    4.用HBSS缓冲液洗涤细胞3次,以充分去除残留的Fura-2 AM工作液。

    5.加入HBSS缓冲液覆盖细胞,37℃孵育约20-30 min,以确保AM体在细胞内的完全去酯化作用。

    6.检测:激发波长 380 nm(游离钙)和 340 nm(结合钙),发射波长 510nm。

    保存条件

    -20℃避光保存,6个月有效,避免反复冻融。 

    注意事项

    1、本产品在4ºC、冰浴等较低温度下可能会凝固而粘在管底、管壁或管盖,可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。

    2、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

    3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

    4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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