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现货
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50ul
产品简介
Fura-2 AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一,是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2 AM 的荧光比较弱,最大激发波长为 369 nm,最大发射波长为 478 nm,并且其荧光不会随钙离子浓度改变而改变。Fura-2 AM 进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成 Fura-2,从而被滞留在细胞内。Fura-2 和钙离子结合后,最大激发波长为 335 nm (最大激发波长随离子浓度的不同而有所不同),最大发射波长为 505 nm。实际检测时推荐使用的激发波长为 340 nm,发射波长为 510 nm。如果做双波长检测,则推荐使用的激发波长为 340 nm 和 380 nm。
本产品是配制于无水DMSO中的储存液,浓度为2mM。
使用方法(仅供参考)
1.Fura-2 AM工作液的配制:用HBSS稀释Fura-2 AM溶液,制备1-5µM的Fura-2 AM工作液。
注:工作液现配现用;具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。为了避免过度加载造成细胞毒性,建议在取得有效结果的基
础上尽量使用最低探针浓度。
2.对于待检测的培养细胞,除去培养基,使用HBSS缓冲液洗涤细胞3次。
3.将Fura-2 AM工作液加入细胞,加入量以覆盖细胞为准。在37℃培养15-60 min,然后除去Fura-2 AM工作液。
注:如果是首次实验不能确定孵育条件,建议先尝试 37℃孵育30分钟,观察荧光效果。如果细胞死亡较多,则适当缩短时间;
如果荧光强度太弱,则适当延长时间。
4.用HBSS缓冲液洗涤细胞3次,以充分去除残留的Fura-2 AM工作液。
5.加入HBSS缓冲液覆盖细胞,37℃孵育约20-30 min,以确保AM体在细胞内的完全去酯化作用。
6.检测:激发波长 380 nm(游离钙)和 340 nm(结合钙),发射波长 510nm。
保存条件
-20℃避光保存,6个月有效,避免反复冻融。
注意事项
1、本产品在4ºC、冰浴等较低温度下可能会凝固而粘在管底、管壁或管盖,可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。
2、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素。Fura-2和钙离子结合后,最大激发波长为335nm(最大激发波长随离子浓度的的不同而有所不同),最大发射波长为505nm。实际检测时推荐使用的激发波长为340nm,发射波长为510nm。如果做
rongshenghao 加入激活剂或抑制剂后打算用Fura-2或者Fluo-3测量细胞内钙离子浓度 问: 1.Fura-2和Fluo-3区别? 2.测量的是游离钙还是总钙呀? 3.还有什么需要注意的? 谢了! 2010tiger Fura-2采用双波长检测,Fluo-3是单波长检测,Fura-2的激发波长是340nm和380nm,发射波长为510nm。Fluo-3的激发波长是506nm
【求助】钙离子的测定参与者:99shaoshuai请问各位师兄,师姐,用Fura-2/AM标记,荧光双波长测细胞内钙离子浓度时,悬浮细胞时,悬浮液里含不含Ca2+,Mg2+离子?如果含Ca2+,Mg2+离子的话,会不会影响细胞内钙离子的测定?为什么?非常感谢!参与者:yangchunzhang1AM基团可以特异的标记细胞内游离钙离子,因而不用担心外液的影响。具体机制请参照染料的说明书。没有AM基团的Fura-2一般用于显微注射,对细胞的要求比较高。参与者:laugh测样品时悬液一般采用生理
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